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文献和实验近日,蒙牛纯牛奶被检测出强致癌物——黄曲霉毒素M1,消息一出顿时又掀起一股食品安全隐患的讨论。相比之前的三聚氰胺,黄曲霉素是否更难检测? 现整理出全套的专业检测方案,让乳和乳制品中黄曲霉毒素M1无处躲藏。 1. 试用范围 牛奶,奶粉,发酵乳,干酪,奶油等乳制品 2. 方法原理 黄曲霉毒素M1易溶于极性溶剂,因此均匀基质中的黄曲霉毒素M1可以通过甲醇/水震荡分散提取,对于高脂肪/油含量的样品基质加入正己烷予以脱脂。本方法采用免疫亲和柱净化,荧光检测器测定乳制品中黄曲霉
免疫亲和层析技术使用单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体。在某些情况下,可用未纯化的多克隆抗体,但一般不使用混合的单克隆抗体。 1. 应用多克隆抗体进行免疫亲和层析 使用多克隆抗体进行免疫亲和层析有一定的局限性,因为多克隆抗体通常结合抗原分子上的多个表位,虽然亲合力高,但洗脱困难。当一种抗原与多种不同的抗体结合后,需要很苛刻的洗脱条件,通常会损坏抗体层析柱,至少也会使部分抗原变性。在这种情况下,每种抗原和抗体相互作用的洗脱条件不同,故难以建立有效的洗脱条件。应用多克
倍。如果所纯化的蛋白质抗原的量非常低,免疫亲和层析必须与其他方法结合,才能获得纯化产物,可以在免疫亲和层析之前或其后采用其他的纯化步骤来完成。例如,常用的方法是在进行免疫亲和层析之前先将样品通过一种或多种标准层析柱;或者将免疫亲和层析的纯化产物进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,再转印到尼龙膜上进行微量测序。 抗体对相应抗原的亲和力是免疫亲和层析法遇到的最麻烦的问题,抗体的亲和力将决定从含抗原的溶液中捕获抗原的总量,高亲和力的抗体(>108 /mol)能在lh以内完成有效地结合;而低
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