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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Mus musculus (Mouse)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR)
- 抗体名:
芳香烃受体(AhR)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug/100ug/200ug
| 规格: | 100ug/200ug | 产品价格: | ¥600.0-¥2400.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100ug/200ug | 产品价格: | ¥650.0-¥1800.0 |
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验益生菌竟然有害健康?破坏免疫抑制,刺激肿瘤生长,化身「癌症帮凶」
。 肿瘤相关巨噬细胞是肿瘤组织中浸润的巨噬细胞,作为免疫细胞中的「墙头草」,部分 TAM 可以杀伤肿瘤细胞,但是部分 TAM 能够促进肿瘤生长、转移和侵袭。 研究内容 AhR 是抑制肿瘤免疫,促进胰腺癌生长的关键 研究人员首先通过 RNA-seq 检测了胰腺导管癌中 TAM 的差异基因表达,和正常的巨噬细胞相比,TAM 中促癌基因 Arg1, Nos2 和 Cd274 表达量明显上调。在 880 个上调的基因中,研究人员关注到编码芳香烃受体(aryl hydrocarbon
力受体CD23即FcεRⅡ结合。这样的结合有利于B细胞等CD23阳性细胞对变应原的摄人、处理并提呈给T细胞,从而增强机体对变应原的免疫应答。 3.引起迟发相I型超敏反应 IgE还与气道炎症及气道高反应(AHR)形成有关。IgE与肥大细胞表面FcεR I结合,使肥大细胞活化。活化后的肥大细胞通过环氧合酶、脂氧合酶途径合成并释放前列腺素、白三烯、血小板活化因子等炎症介质,诱导气道嗜酸粒细胞等炎性细胞浸润并引起AHR。 4.调控FcεR I与FcεRⅡ(CD23)的表达 IgE
如果培养的细胞在细胞表面上有许多 FC 受体(如单核细胞,巨噬细胞),或者细胞在无血清的培养基上培养。通过用人 AB 型血清对细胞进行前处理后,会明显地阻断单克隆抗体的非特异性结合。注意此法并不适用于全血染色,因为在全血染色中有高浓度的血清存在。 Ⅰ 、反应体系 A、 抗体 1、 第一抗体:常用的或自备的抗体 a、 如果第一抗体或自备的抗体能够进行荧
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