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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Homo sapiens (Human)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Carcinoembryonic Antigen Related Cell Adhesion Molecule 1 (CEACAM1)
- 抗体名:
癌胚抗原相关细胞粘附分子1(CEACAM1)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug/100ug/200ug
| 规格: | 100ug/200ug | 产品价格: | ¥650.0-¥1800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100ug/200ug | 产品价格: | ¥650.0-¥1800.0 |
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验,高压灭菌后保存。用时加热融化,冷却至50℃左右,加抗原进行乳化处理。(2)弗氏完全佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)弗氏不完全佐剂10ml卡介苗10mg~200mg卡介苗可100℃10min灭活处理。初次免疫时,最好用弗氏完全佐剂,以刺激机体产生较强的免疫反应。再次免疫时,一般不用完全佐剂,而采用弗氏不完全佐剂。但在研究分枝杆菌及相关抗原时,一般不用弗氏完全佐剂,以免卡介苗的干扰。(3)脂质体:是人工制备的类脂质的小球体,由一个或多个酷似细胞膜的类脂双分子层组成
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的作用。如果有条件,可以把抗体进行冷冻干燥形成冻干粉,放在-80 ℃。如果抗体尚未纯化,直接以血清的方式保存在-20 ℃以下,也可以很好地保证其活性。 (5)浓度。和普通蛋白质一样,浓度越高就越利于保存。如果抗体浓度太低,可以采用超滤、protein A或Protein G(操作方法参考单抗纯化相关介绍)、透析袋等方式浓缩。超滤的方式操作简单,直接将抗体装入超滤管再进行离心即可。透析袋浓缩操作也比较简单,将PEG(分子量大于8000)配成50%左右的溶液,用合适孔径的透析袋装好抗体,然后放
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