- ￥650 - 1800
- KALANG/进口品牌
- 中国/美国
- kl232Ra01
- 2025年07月11日
- WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- Rabbit，兔
- Rattus norvegicus (Rat)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
见说明书
- 亚型：
见说明书
- 形态：
粉末/液体
- 保存条件：
-20oC 至 -80oC
- 克隆性：
Polyclonal
- 标记物：
未标记
- 适应物种：
Rattus norvegicus (Rat)
- 宿主：
Rabbit，兔
- 应用范围：
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度：
200ug/ml
- 靶点：
见说明书
- 抗体英文名：
Polyclonal Antibody to Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2)
- 抗体名：
心肌肌钙蛋白T(TNNT2)多克隆抗体
- 规格：
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异，种系相近会影响免疫效果，一般要求动物适龄，健康，体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml， 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放，增加免疫效果，常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间，小动物一般间隔10~14天，大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后，进行抗血清效价测定，当效价达到理想状态时，便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血，静置待血液凝固成血块收缩析出血清，3000rpm离心15 min，取上清。这个过程要注意动物的养护，耗时长，但得率低，得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点，在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验实验步骤 1. 蛋白螯合 根据UV吸光值测量半抗原/蛋白的摩尔比率评价半抗原螯合蛋白(BSA，OVA)。半抗原/蛋白的摩尔比率基本一致，磺胺类药物/蛋白质的摩尔比率范围为20至40；而免疫原和螯合物的比率为3至9；对HRP螯合半抗原/HRPd摩尔比率范围为2至3。 2. 免疫 免疫原(0.20mg/0.5mLPBS)溶解于0.5mL弗氏完全佐剂中，肌肉注射于雌新西兰白兔(I和II)。间隔21天注射相同剂量
3敢和PD-1并驾齐驱，TIM3到底是何方神圣? TIM全名T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白（T cell immunoglobulin mucin），还有个洋气的名字CD366，是2002年money等[6]在研究哮喘易感基因的过程中发现的。人类TIM家族只包括TIM1、TIM3和TIM4，位于5号染色体5q33.3上，TIM分子的共同结构包括：免疫球蛋白N末端可变区、粘蛋白结构域、跨膜区和胞内区。 图片来源于：http://www.genecards.org/cgi
10X TBS：24.2 g Trisbase, 80 g NaCl；用1N HCl调pH为 7.6 7. 甲醇 8. TBS/T缓冲液：1X TBS, 0.1% Tween-20 9. 封闭缓冲液(TBS/T)：1X TBS,0.1% Tween-20加5% w/v脱脂奶粉或BSA 10. 一抗的稀释：1X TBS,0.1% Tween-20 加 5% BSA ( 多抗) 或 5%脱脂奶粉( 单抗)。Note： 一般来说，BSA被推荐用于多克隆抗体
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