- ￥600 - 2400
- KALANG/进口品牌
- 中国/美国
- kl551Po01
- 2025年07月15日
- WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- Rabbit，兔
- Sus scrofa; Porcine (Pig)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原：
见说明书
- 亚型：
见说明书
- 形态：
粉末/液体
- 保存条件：
-20oC 至 -80oC
- 克隆性：
Polyclonal
- 标记物：
未标记
- 适应物种：
Sus scrofa; Porcine (Pig)
- 宿主：
Rabbit，兔
- 应用范围：
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度：
200ug/ml
- 靶点：
见说明书
- 抗体英文名：
Polyclonal Antibody to Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2)
- 抗体名：
碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)多克隆抗体
- 规格：
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异，种系相近会影响免疫效果，一般要求动物适龄，健康，体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml， 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放，增加免疫效果，常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间，小动物一般间隔10~14天，大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后，进行抗血清效价测定，当效价达到理想状态时，便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血，家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血，静置待血液凝固成血块收缩析出血清，3000rpm离心15 min，取上清。这个过程要注意动物的养护，耗时长，但得率低，得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点，在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验的机理如下： 连接反应进行的条件： （1）Buffer体系。上述两个连接反应都应该在碱性环境下进行。pH宜在8-10之间，推荐使用Na2CO3-NaHCO3体系,pH尽量偏离蛋白的等电点，但不可高于10，否则填料很容易水解。pH也不能过低，否则抗原的氨基或巯基会被质子化，无法与beads结合。也可以考虑用其它的缓冲体系，但是绝对不可引入带有游离氨基或者巯基的化合物。为了防止蛋白类抗原的聚集，体系中还可以加入0.5M NaCl以提高盐离子浓度。 （2）蛋白质浓度
DEAE-Sephadex A-50 提取法纯化多克隆抗体 DEAE-Sephadex A-50(简称A-50)为弱碱性阴离子交换剂，经过NaOH处理将Cl- 型转为OH- 型后，可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白属中性蛋白，等电点为pH6.85～7.5，其余均属酸性蛋白。在溶液为pH8.0时，酸性蛋白均被A-50 吸附。从而可分离纯化IgG。 1. 批量吸附法 此法可在1天内完成提取过程，纯化前后样品体积变化不大，
蛋白质印迹分析(Western Blot Analysis)
【实验目的】 了解蛋白质印迹法的基本原理及其操作和应用。 【实验原理】 蛋白质印迹法又称为免疫印迹法，这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。待测蛋白既可以是粗提物也可以经过一定的分离和纯化,另外这项技术的应用需要利用待测蛋白的单克隆或多克隆抗体进行识别。 如图所示，可溶性抗原，也就是待测蛋白首先要根据其性质，如分子量，分子大小，电荷以及其等电点等采用不同的电泳方法进行
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