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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Canis familiaris; Canine (Dog)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a)
- 抗体名:
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验小鼠 巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中 巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α) 的 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 小鼠 巨噬细胞炎性蛋白1 α (MIP-1 α ) 水平。用纯化的 小鼠 巨噬细胞炎性蛋白1 α (MIP-1 α ) 抗体包被微孔板,制成固相
;加入羊抗人α2M多克隆抗体,37~C 2h,洗涤;加入HRP标记的兔抗羊IsC,孵育后加入底物呈色。终止反应后在酶标仪上读取492nm波长的吸光度值。按常规绘制标准曲线,算出待测血a2M含量。 3.正常值范围与临床意义 免疫扩散法测得正常男性血清a2M为1.5~3.5z/L,女性为1.35~4.2g/L。2—4岁儿童血清a2M约为成人的2~3倍。更年期妇女血清e2M含量也较高。ELBA法检测正常人尿液中Q,M含量均低于0.026mg/L
免疫球蛋白 Fc 段受体 Fc α R FcαR 即CD89分子,包括a1、a2和a3等不同的异型,其中a1是跨膜形式,胞膜外区有2个IgSFC2样结构域。CD89分布于外周血和黏膜组织中绝大部分吞噬细胞,某些T细胞和B细胞亚群也表达CD89。a1异型表达于单核细胞和中性粒细胞,a2异型表达于肺泡巨噬细胞。CD89可与IgAl和IgA2 h段结合,CD89为IgA中亲和力受体,能结合血清型或分泌型IgAl和IgA2,介导吞噬细胞的吞噬作用、超氧产生、释放
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