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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Mus musculus (Mouse)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)
- 抗体名:
杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验脂抗体(抗J5血清)能够明显改善腹腔感染伴MODS的代谢紊乱,对高分解代谢具有显著的调理作用。 主动免疫:脱毒LPS疫苗(针对LPS的核心糖脂),采用E. coli J5 galE变异株的脱乙酰化LPS与B型脑膜炎球菌的一种外膜蛋白结合。在实验动物中显示高度的免疫原性和良好的耐受性。产生的多克隆抗体可结合到一些G-杆菌的LPS核心区,保护动物免于致死量内毒素攻击和G-细菌的侵袭性感染。 (3)杀菌/通透性增加蛋白 杀菌/通透性增加蛋白(bactericidal
蛋白(LF),组织蛋白酶G(CathG),杀菌/通透性增强蛋白(BPI),人溶酶体相关膜蛋白2(H-LAMP2),溶菌素(LYS),天青杀素,防御素,烯醇化酶,葡萄糖醛酸酶。 根据乙醇固定的中性粒细胞基质片中,可以区分两种不同的荧光模型:一种胞浆型(c-ANCA),是均匀分布在整个中性粒细胞胞浆中的颗粒型荧光,细胞核无荧光。在乙醇和甲醛固定的中性粒细胞片中,其荧光模型表现相同。其主要的靶抗原是蛋白酶3(PR3)。 另一种是核周型(p-ANCA),是围绕中性粒细胞细胞核周围的平滑带状荧
相同。不同的蛋白捕获剂对不同膜的吸附能力不同,或许这一因素至关重要。单克隆抗体作为较均一的蛋白捕获剂,优化与NC膜的结合过程较为简单,而多克隆抗体由于含有针对大量不同的抗原决定簇的抗体,不同抗体的最佳结合条件可能稍微不同,从而导致蛋白与膜结合条件的优化过程较为复杂。比如IgA、IgM存在结构或者空间位阻等因素,其与膜结合条件的优化过程较为困难。比如BSA、A蛋白以及G蛋白由于化学性质或者分子太大较易吸附于固相载体,从而非常难将其吸附于NC膜。仪器设备 捕获剂喷涂系统仍然存在某些问题,大多数商品化可用
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