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- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100 µg
蛋白名称:KIR2DL4蛋白, KIR2DL4 protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the human KIR2DL4 (ADY38409.1)(Met1-His242) was expressed with the Fc region of human IgG1 at the C-terminus.
表达宿主:CHO Stable Cells
蛋白纯度:> 95 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Trp 24
蛋白分子量:The recombinant human KIR2DL4/Fc is a disulfide-linked homodimer. The reduced monomer comprises 462 amino acids and has a predicted molecular mass of 51.3 kDa. The apparent molecular mass of the protein is approximately 62, 34 and 32 kDa in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:ADY38409.1
蛋白氨基酸序列:Met1-His242
蛋白标签:C-human IgG1-Fc
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验x 106/ml; 3.4 加入1 000 U/ml 的重组人IFN-g培养; 3.5 24h 后加入50ng/ml 的CD3 单克隆抗体和300 U/ml 的重组人IL-2,刺激CIK 细胞的生长和增殖; 注:此时也可同时加入100 U/ml的重组人IL-1a。 3.6 每3天半量换液或扩瓶一次,并补加重组人IL-2 300 U/ml; 3.7 在培养的第7d,收获CIK细胞,此时数量应达到1x 109个以上。 3.8 CIK细胞质控: 3.8.1 台盼蓝染色检测
、ionomycin和Brefeldin A,其中前两者协同激活细胞,后者抑制蛋白转运,从而有效增强胞内细胞因子的积累与检测信号。 03 封闭剂 单核细胞、巨噬细胞和B细胞表面高表达Fc受体,易非特异性结合抗体的Fc段,导致假阳性信号。为解决此问题,菲恩生物提供Purified Anti-Mouse CD16/32 Antibody(FNab30106)用于小鼠样本封闭,;Human Fc Receptor Blocking reagent(K128)用于人样本封闭。关键在于必须选择与样本
的培养及鉴定 2.1 将PBMC按1-2 x 106/ml的浓度悬浮于无血清培养液中,加入1,000 U/ml 的重组人IFN-g,37oC,5%CO2培养箱中培养; 2.2 24h 后加入50ng/ml 的CD3 单克隆抗体和300 U/ml 的重组人IL-2,刺激CIK 细胞的生长和增殖; 注:此时也可同时加入100 U/ml的重组人IL-1a。 2.3 每3天半量换液或扩瓶一次,并补加重组人IL-2 300 U/ml; 2.4 在培养的第14d,收获CIK细胞。
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