PCR增量剂(PCR Enhancer)
——帮您迅速提升PCR产量
【产品介绍】
PCR增量剂(PCR Enhancer),是由我们独家开发的一种非传统PCR增量物质,能显著提高PCR扩增产量,适用于制备高含量PCR产物、提高荧光PCR曲线信号、提高基因芯片检测灵敏度等。
【工作原理】
本品可提高大多数耐热Taq DNA聚合酶活性,在抑制非特异性PCR扩增的基础上增加PCR产量。与已知PCR增强剂不同,本品可延缓聚合酶活力的衰减,抑制非特异性扩增,从而提高PCR扩增产量,并提升对低拷贝核酸的扩增。
【使用方法】
本品建议基础用量为每10μl扩增体系中加入0.2μl PCR增量剂,按照正常PCR扩增条件反应。增加用量有助于获得更高PCR产量,对于不同试验,一般每10μl PCR扩增体系中加入本品0.2-1.0μl有助于获得最大量PCR产物。
【注意事项】
l 本品适于大多数Taq酶、逆转录酶以及PCR预混反应体系。
l PCR产量增加与本品的用量有一定关联,每10μl PCR体系加入本品1.0μl以下时能满足大多数对PCR产量的需要,尚未收到更高用量的不良报告。
l 本品有助于逆转录酶在较高的温度下(50-55度)进行高效的逆转录反应。
l 本品显著优于已知PCR增强剂如甜菜碱等,但已发现甜菜碱与本品共存可能抑制PCR扩增,导致PCR产量减少。
l 本品对荧光PCR以及基因芯片检测等试验的改善是是通过提高PCR产量来实现。通过对PCR引物和探针的改进有助于获得最佳扩增曲线。
【产品规格】100μl/支,1.0ml/支。
【产品保存】2-8℃,密封避光保存,避免反复开盖。
【产品有效期】24个月。温度改变对本品质量没有影响,但须注意反复冻融可能导致溶液浓度不平衡的情况。
【对比试验结果】:
图1:本品对荧光PCR曲线的改善 图2:不同量本品对PCR的影响
(模板:病毒DNA;promega Taq聚合酶) (模板:质粒,r-Taq聚合酶,20ul体系)
货号
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名称
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规格
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价格(RMB)
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YB0904
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PCR Enhancer
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100μl /支
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200.00
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YB0905
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PCR Enhancer
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1.0ml /支
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1800.00
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PCR增量剂对PCR扩增过程的影响
l 本品可以提高PCR产物的产量,对于不同浓度的DNA模板,均有提高扩增产量的效果。
l 对于荧光PCR反应,其信号增强幅度大小与探针的工作效率密切相关,因此适当的修正探针有助于您获得更好的扩增曲线。
l 本品不具备使PCR扩增循环数提前的功效,如有需要请使用本公司其他产品。
l 本品所有测试图片均由科研用户协助提供。
以上图片均使用某进口荧光PCR预混反应液完成测试,模板为不同浓度的HBV DNA。
加入本品后PCR扩增无效的报告:
l 有报告显示甜菜碱和本品共存可抑制PCR扩增,导致PCR产量减少。由于不同厂家的高性能Taq聚合酶及缓冲液中添加成分存在较大差异,因此可能出现相反结果。
l 部分报告在一步法RT-PCR扩增RNA模板时未检测到PCR产物,但尚未验证是否与甜菜碱有关联。
l 对于荧光PCR试验的影响不同用户报告的结果不同,有效和无效的结果均存在。
l 对于使用兼并引物的PCR体系是否有效尚待测试。