转基因水稻检测(IR)大米阳性对照质粒2

转基因大米中Bt基因检测

30 s）；第三阶段72 ℃延伸7 min。5、核酸检测对PCR 产物进行凝胶电泳。SPS 扩增产物大小277 bp，Bt 扩增产物大小301 bp。6、结果确认采用含Bt 基因的质粒作为阳性对照，确认不含Bt 基因的水稻做印性对照。阳性对照SPS与Bt 基因都扩增出来，阴性对照只扩增出SPS 基因。待测样本如扩增出SPS 基因，表明含水稻成份。如扩增出SPS 基因和Bt 基因，表明含转基因水稻成份。普通PCR 实验只能确定样本中是否含转基因成份。需要确认转基因水稻含量可以通过Realtime

一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法

no.DQ434847）转入烟草（Nicotiana tabacum L.cv.W38），所得T0代植株在16h光照（25℃）/8h黑暗条件下培养。1.2 方法1.2.1 转基因植物的PCR鉴定　　随机挑取六株T0代转基因烟草，采用植物基因组DNA提取试剂盒（北京天根生化科技有限公司）提取基因组DNA模板，另外分别以未转化的野生型烟草基因组DNA以及含有OSsec27p的重组质粒作为阴性和阳性对照模板，使用OSsec27p基因特异性引物进行PCR扩增。　　取部分扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测，检测

基因插入位点和模式

/0.5 pg 每个水稻基因组=107 基因组，6.3X10-18X107 g=63 pg 质粒对于每个 2 C 水稻基因组）。代表高拷贝数的外源基因插入的标样会产生的强杂交信号，信号衰减的时间比较长，甚至用化学法洗膜后信号还存在（见标注8) 。制备标样 DNA 时，可以在野生型 DNA 中加入多个不同的转基因质粒，但需保证这些质粒酶切后的产物长度不同，且其长度差异足够防止后期杂交信号的相互干扰。 注 14 : 大量提取已经鉴定过的 1 个（最好为 2 个）转基因系（ 作为阳性对照）和野生型（作为阴性