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转基因木瓜检测55-1阳性对照质粒2
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文献和实验一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
no.DQ434847)转入烟草(Nicotiana tabacum L.cv.W38),所得T0代植株在16h光照(25℃)/8h黑暗条件下培养。1.2 方法1.2.1 转基因植物的PCR鉴定 随机挑取六株T0代转基因烟草,采用植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根生化科技有限公司)提取基因组DNA模板,另外分别以未转化的野生型烟草基因组DNA以及含有OSsec27p的重组质粒作为阴性和阳性对照模板,使用OSsec27p基因特异性引物进行PCR扩增。 取部分扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,检测
对于试验成功与否至关重要。最关键的是,应使用专门配制、输送小分子 RNA 的转染试剂(大部分市售的转染试剂设计用于大型质粒 DNA,而不是小 RNA 分子)。此外,仅有部分试剂设计用于特定细胞系的转染,而多数试剂的特异性范围较广。Lipofectamine RNAiMAX 是专为将 siRNAs 高效转染真核细胞而设计的转染试剂。 8.使用一个适当的阳性对照来优化转染和检测条件 对于大部分细胞,管家基因适合作为阳性对照。向靶标细胞转染几个浓度的、对您所选择的阳性对照特异的 siRNA。(这也适用
生物发光(bioluminescence)是指生物体发光或生物体提取物在实验室中发光的现象。生物发光成像是一种研究技术,它使用来自自然物种的荧光素酶或这些酶的改良荧光素酶来跟踪细胞或动物内部的生物过程。荧光素酶通常编码在报告基因中,该报告基因被引入到感兴趣的细胞或动物中。感光相机(CCD)检测到的光子数代表了所选生物过程的变化。 实验原理: 利用转基因技术,将荧光素酶基因连接于启动子下游,稳定整合到质粒内,再通过原核显微注射的方法,使其整合到小鼠受精卵基因组中下,并稳定遗传给后代。使荧
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