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- 2025年12月08日
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中乔新舟
技术原理：
CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是一种广泛存在于细菌与古细菌中的，由RNA介导的可遗传的获得性免疫系统，这种免疫系统为宿主细胞提供了对外源DNA（如噬菌体质粒）的免疫功能。
此系统的工作原理 是CrRNA(CRISPR-derived RNA)通过碱基配对与tracrRNA (trans-activating RNA)结合形成tracrRNA/crRNA复合物，次复合物引导核酸酶Cas9蛋白在与CrRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。而通过人工设计这两种RNA，可以改造形成具有引导作用的SgRNA (short guide RNA)，足以引导 Cas9对DNA的定点切割。中乔新舟 目前已经成功将此技术应用于大、小鼠基因KO/KI的模型制备，以及条件性敲除（Loxp系统）模型的制备。
CRISPR/Cas9技术特点：
1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除；
2、可对基因进行定点修饰（Tag、GFP、RFP、点突、条件性敲除）；
3、试验周期短、价格低、效率高；
4、可应用于大、小鼠等。
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文献和实验，jaxmice公司卖的是不是已经缺失好的，还是，还得自己通过交配构建敲除老鼠？比如，我要一种HIF1α基因敲除的老鼠，jaxmice公司查到的 B6.129-Hif1atm3Rsjo/J （http://jaxmice.jax.org/strain/007561.html）是什么意思？谢谢！ springstar100 要买转基因小鼠或者基因敲除相关信息，可以联系 springstar100@126.com 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意
相关专题基因敲除小鼠 小鼠和大鼠可谓是生命科学实验室里的明星，成功的小鼠和大鼠模型可谓是“生命科学的好帮手”。很多人可能想自己设计或是了解条件性基因敲除小鼠，在此做个小结，供大家参考。 条件性基因敲除小鼠的设计利用了Cre/LoxP或Flipe/Frt原理。它们都是位点特异性重组 酶系统。这里以Cre/LoxP系统为例。比如在待敲除的一段目标DNA序列的两端各放置一个loxP序列，得到flox(flanked by loxP)小鼠
DNA的重组 DNA Recombination一、同源重组发生在同源序列间的重组称为同源重组(homologous recombination)，又称基本重组。是最基本的DNA重组方式，通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。二、细菌的基因转移与重组（一）接合作用(conjugation)：当细胞或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞（细菌）,这种类型的DNA转移称为接合作用。质粒：细菌染色体外的环状双链DNA分子。可接合质粒
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