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文献和实验就可以了。 如果我找到个质粒，将这个基因连上去之后，怎么才能鉴别/筛选目的基因正反向的问题 你可以根据质粒图谱看，定向将启动子CMV后 将基因定向克隆进去，利用酶切反应及连接的特异性。 ps： 感觉你对自己的实验目的都不是很清楚，这很危险！宁可不做，就怕费力不讨好！ bigbang_0_0 用pEGFP质粒，很适合GFP标签的蛋白的表达； 如果做稳定转染，需要用G418筛选标记 (neo r)
，双酶切位点Bbs 1和Bamh1 ，构建完后Bbs1酶切位点失活，做不了双酶切；你们有遇到过这种情况吗？吉玛技术部的说他们所有的shRNA都是这样；载体用的是PGPU6/GFP/NEO panpan4710 科研穷三代，吉玛毁一生啊~~~ damao113098 楼上的兄弟幽默了 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微
of function）。然而，像 spCas9 这样的基因序列太大，无法适应 rAAV 载体。较大的基因偶尔作为分裂模块通过 AAVs 在宿主细胞中重组或使用慢病毒进行传递。在借助 rAAV 载体进行体内基因传递时，病毒的注射方式、注射体积及血清型的选择都是尤为重要。借助定点注射和整体注射，rAAV 载体能够在大量细胞中广泛表达，中枢神经系统中最常用的包括 rAAV2/1、rAAV2/5、rAAV2/8、rAAV2/9、rAAV2/retro、rAAV2/PHP.eB 等，这些病毒载体对于不同细胞亦有一定的亲和
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