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文献和实验DNA Methylation Analysis by Bisulfite Sequencing (BS)
sequencing (BS) (Figure 2) Sequencing bisulfite-altered DNA is the simplest means of detecting cytosine methylation. After denaturation and bisulfite modification, double-stranded DNA is obtained by primer extension and the fragment
成分 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 葡萄糖 5g 硫酸亚铁 0.3g 磷酸氢二钠 4g 煌绿 0.025g 柠檬酸铋铵 2g 亚硫酸钠 6g 琼脂 18～20g 蒸馏水 1000mL pH7.5 制法 1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。 2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏
我养了三种贴壁的细胞，用同样的消化方法，都很好。这三种细胞是A549，ECV304，2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次（要冷，用前4度中取出）。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟（2BS需要的时间更短，约1分钟）5、镜下观察（我一般都省略了，因为每次的效果都很好）,见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。（我们的胰酶都不去掉）6、从瓶口到瓶底吹打，可见细胞
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