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文献和实验真DNA聚合酶可能会导致此问题。大肠杆菌 BL21（DE3）中的蛋白质表达重组pET-32α（+）载体可以表达所需的蛋白质，其在被异丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后与大肠杆菌 BL21（DE3）中的109aa Trx•Tag TM融合。首先，将含有100μg/ ml氨苄青霉素的10ml LB培养基与含有重组pET-32α（+）载体的新鲜细菌菌落一起接种37℃过夜; 然后，将500-μl过夜培养物加入到含有100-μg/ ml氨苄青霉素的30-ml新鲜LB培养基中，在37℃接种直至OD 600
了。这次用的是100 ug/ul的Amp浓度。转接的时候是1:500稀释。（我不知道1:100行不行，一朝被蛇咬，十年怕井绳啊。在OD600达到0.8的时候诱导。 转接的时候做对照：IPTG 0 h， 同时做诱导：2 h, 3 h 主要结果有三： A 有表达； B 阴性对照也有表达 ，所以这个结果不是很convincing； C 目的蛋白应该在30 kD，但分子量显示是36 kD左右（这个问题是个低级错误，接下来的帖子会指出 ）。 原因
是positive expression control。是pET15b携带b-galactosidase的一个构建。泳道1－8是全细胞蛋白电泳；泳道9－12是取沉淀电泳；13－16是上清电泳。结果：a. 有glucose的阴性对照无带（或非常浅）。b. 无glucose的阴性对照有带，但整体来说比诱导的弱。c. 诱导的有带。d. 蛋白大小还是不对（其实是对的，我冤枉它了，请看后面的帖子）。结论：培养基中确实很可能存在lactose。而且应该是造成阴性对照有表达的原因。 现在头疼的就是分子量的问题
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