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文献和实验相关专题 总有一种转染方法适合你 参与者：水仙子2005 最近用pIRES2-eGFP做转染 ，可是看不到荧光(就连空载体也没有)，由于实验要在3月底出结果，所以现在很急，准备寒假加班加点做。 有人说这个载体 的GFP表达很不稳定，不知道有没有人用过这个载体，能否给点建议，对于好的建议愿以积分相赠。 参与者：Crazyvirus 不知你是固定以后观察荧光还是转染 后直接看的，若是固定
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
见的四类是 EGFP（增强型绿荧光蛋白）、mCherry（红荧光蛋白）、荧光素酶（Luciferase，分萤火虫和海肾两种），以及其它荧光蛋白（ZsGreen1、tdTomato 等）。选哪个，取决于你最后靠什么设备读信号。 荧光蛋白和荧光素酶的核心区别 荧光蛋白（EGFP、mCherry 等）靠外来激发光打出荧光，能直接在显微镜下看到蛋白在哪、长什么样，适合定位和活细胞成像，但激发光有光毒性、细胞本身也可能有自发荧光造成背景。 荧光素酶靠加底物催化发光（化学发光法），不需要激发光、所以没
pSUPEREGFP表达 绿色 荧光蛋白和目的基因的融合蛋白，目的基因位于N端 kan/neo 4.7kb E. coli/mammals pIRES2-EGFP pIRES2EGFP 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals pIRES2-ZsGreen1 双顺反子表达目的基因和 绿色 荧光蛋白，目的基因位于C端 kan/neo 5.3kb E. coli/mammals pIRES-hrGFP-1a pDsred1-N1
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