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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
500 ml
F-12 营养混合物(Ham's F-12 Nutrient Mixture)是由 Ham 在 1969 年以 F-10 营养混合物为基础设计而成 的,最初用于 CHO 细胞的无血清培养。F-12 常作为无血清培养的基础培养液,在低血清含量下时,特别适合单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也广泛应用于癌细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等。此外, F-12 与 DMEM 等体积混合后,得到的 DMEM/F12 培养基营养更为丰富,使用更为广泛。
【技术参数】
血清: 新生牛血清
酚红: Yes
L-谷氨酰胺:0.146g/L
抗生素: 青霉素80U/ml;链霉素0.08mg/ML
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文献和实验,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基,确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃,5%CO2 的培养箱中培养,每 2-3 天更换培养基(用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。 类器官传代 14、吸出类器官培养液,机械分离 Matrigel,然后加入 500μl 胰蛋白酶,放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后,用移液器多次吹打,从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化,在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS
基础培养基 RPMI-1640 RPMI-1640 RPMI-1640 Advanced DMEM-F12 Advanced DMEM-F12 DMEM-F12 penicillin-streptomycin - - - 1×P/S (5,000U/ml) 1×P/S (5,000U/ml) 1×P/S (5,000U/ml) dFBS(v/v) - 0.2% 2% - 1% -










