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凯基生物
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500 ml
DMEM/F12 培养基是在 DMEM 培养基的基础上,添加 F12 培养基中更为丰富的营养成分,含有多种微量元素,广 泛应用于多种哺乳类细胞的培养。同时,DMEM/F12 培养基常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下 哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。
HEPES 是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加 HEPES 的培养基能够较长时间保持恒定的 PH 范围, 可以有效的防止培养液 PH 波动较大对细胞生长产生不利的影响。
【技术参数】
血清: 新生牛血清
酚红: Yes
L-谷氨酰胺: 0.365g/L
抗生素:青霉素80U/ml;链霉素0.08mg/ML
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文献和实验,之后将过滤后的悬液装到一个5ml 离心管 中,之后向过滤后的悬液中加入含10%新生牛血清的DMEM培养基到5ml, 于4℃冰箱中静置20min 。 6、 用吸管弃除悬液, 加入DMEM培养基至5ml, 以1000 转/ 分离心4min , 弃上清,如此反复3 次。 7、 最后离心完后再加入2ml含10%新生牛血清的DMEM完全培养基,收集肝细胞于培养瓶中,进行台盼蓝活 细胞计数 ;
,450×g、4℃离心5min,弃上清。 ⑨将沉淀重悬于原溶液中,并与细胞外基质(BME)混合。 2.肠道类器官培养 ①将细胞悬液接种至预热的细胞培养板中。 ②将培养板倒置,置于37℃、5%CO₂细胞培养箱中静置20min。 ③每孔加入500μL含10μMY27632的培养基,置于培养箱中培养。 ④约1周后,进行机械分割以实现类器官的持续培养和传代。 3.人肠道类器官的机械分割、传代与扩增 ①吸去培养类器官的培养基,用4℃预冷的1mL高级DMEM/F12洗涤,用移液管将类器官收集至含4℃高级
多为小牛血清or新生牛血清,并非真正的胎牛血清。不论使用那一种血清,提醒您注意一下是否已灭活。 去除胰蛋白酶时最好用含血清的培养液在4℃下离心,血清不仅可以中止胰蛋白酶的作用,对细胞也有保护作用,一般用800~1000rpm转10min即可,最好离心洗涤3次。传代后不长有可能与胰蛋白酶有关。 生长状态良好的PC12,接种48h应该到了对数增长期。 丁香园pz_penny的问题: 我的pc12神经细胞繁殖速度超慢,已经超过一个月了,平皿的汇合度还只有大约30%,我用的是f12k培养基+10%











