F12K培养基（不含双抗）KGL1901-500

检测细胞增殖，你的方法用对了吗？

液：用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液（1000×）RPMI 1640 完全培养基：RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏，研磨成单细胞悬液，用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞，将细胞过 40 μm 细胞滤网后，进行细胞计数。样本清洗液洗涤（可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替），1 500 rpm 离心 5 min，用 PBS 重悬，调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE

类器官培养与应用——肠类器官

第 2 天内胚层分化培养基，替换为每孔 5ml 预热的第 3 天内胚层分化培养基，并将平板放回 37℃，5%CO2 的培养箱中。 8、24h 后，吸出第 3 天内胚层分化培养基，用不含 Activin A 的第 3 天内胚层分化培养基洗涤细胞一次。此时在显微镜下观察细胞，应该存在扁平的 DE 组织，该组织包含非常少的 3D 结构。   DE 分化为中肠和后肠 9、从 24 孔板中吸出培养基，每孔滴加 5ml 预热的中肠和后肠分化培养基。每 24h 更换一次新鲜中肠和后肠分化培养基，直至 96h 。 10

类器官培养与应用——卵巢癌类器官

Cancer Organoid) 培养基，确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃，5%CO2 的培养箱中培养，每 2-3 天更换培养基（用于换液的 OCO 培养基内不含 Y27632)。   类器官传代 13、当直径达到约 200-300μm 时，将类器官按照 1:3-1:5 的比例进行传代（具体比例通过类器官的汇合度确定） 14、吸出孔内培养基，加入 400μl 预冷的 DMEM/F12 培养基，并用移液器多次吹打，从基质胶中释放类器官。如果将多个孔合并，则将 400μl 培养基从第一个孔转移到下一个孔