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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
500 ml
IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium)即 Iscove 改良的 DMEM 培养基,是 Guilber 和 Iscove 在1976 年设计的,用以培养红细胞前体细胞和巨噬细胞。IMDM 培养基在 DMEM 培养基的基础上添加了硒、HEPES、Sodium pyruvate以及额外的氨基酸和维生素,并用KNO3代替了Fe(NO3)3,营养非常丰富,非常适合于快速增殖,高密度细胞培养。IMDM 培养基不仅可以培养有特殊营养要求的细胞(如小鼠 B 淋巴细胞,LPS 刺激的 B 细胞,骨髓造血细胞,T 淋巴细胞以及各种杂交瘤细胞),还可以作为一些独特的无血清培养基的基础液。
【技术参数】
血清: No
酚红: Yes
L-谷氨酰胺: 0.584g/L
抗生素: 青霉素80U/ml;链霉素0.08mg/ml
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文献和实验入培养箱中培养; 6) 培养6-8小时后观察,细胞如果一切正常的话,换含血清的培养基,换液时要洗2-3次,换液后继续培养24-36小时。 配方: IMDM培养液(购自GIBCO公司),含10%胎牛血清(FBS)、1%非必需氨基酸、1μM 二氢睾酮(DHT)(培养附睾上皮细胞需要加,COS7不用)(以上均购自PAA公司); T/E:培养基中含有:5%胰 蛋白酶 ,0.53M EDTA )
分钟收集细胞; 5. 将上一步离心得到的细胞沉淀,重悬至扩增培养基中,并进行计数。 1.3 细胞刺激(次日) 扩增培养基成分:RPMI1640 + 10% 血清 + 5ug/ml anti-mouse CD28(克隆号:37.51) + 双抗 1. 将细胞浓度调整至 1-2×10^6/ml(本次实验为 2×10^6/ml,该浓度偏大); 2. 从 4°C 冰箱取出前一天包被的板子,弃掉包被液,无菌PBS洗涤3遍; 3. 每孔加入 500μl 细胞悬液,放置于 37°C 含 5% CO2 细胞
lipofectamine 2000脂质体转染293ft细胞经验
lipofectamine 2000 per well 溶液2:200ul 无血清培养基 + 1 ug GFP per well 将溶液1与溶液2混合,室温下置30min后加入600ul无血清培养基;PBS 冲洗细胞后每well加入500ul 混合的溶液。 Day 2:18小时后用PBS 冲洗细胞,加入含10%血清的培养基。隔天观察细胞绿色荧光。 但是做到Day 1的时候,即加入lipofectamine后细胞就死亡了,后来老板说可能时间太长了,改18小时为4小时










