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凯基生物
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500 ml
Dulbecco‘s 改良培养基--DMEM(Dulbecco‘s Modified Eagle Medium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及Sodium pyruvate。DMEM培养基最初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。该培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产。
【技术参数】
血清:无血清
酚红:Yes
L-谷氨酰胺:0.584g/L
抗生素:青霉素80U/ml;链霉素0.08mg/ML
【文献引用】
Hu Y, Li X, Fang Y, et al. Reactive oxygen species-triggered off-on fluorescence donor for imaging hydrogen sulfide delivery in living cells[J]. Chem Sci. 2019. IF=9.6
Wang C, Li Y, Xu E, et al. A label-free PFP-based photoelectrochemical biosensor for highly sensitive detection of PARP-1 activity[J]. Biosens Bioelectron. 2019. IF=9.518
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文献和实验,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材:空气栓塞法处死家兔后,在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基(含双抗)。迅速带回到无菌超净台上。(注意事项:椎间盘位于相邻两个椎体之间,取材过程较为繁琐,要求动作迅速,争取在家兔死后半小时内完成,否则,该组织对缺氧耐受性差导致培养失败)。2、剪切:在超净台上,进一步将周围组织分离,用Hank’s液冲洗数遍,直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块,Hank’s
缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基,确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃,5%CO2 的培养箱中培养,每 2-3 天更换培养基(用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。 类器官传代 14、吸出类器官培养液,机械分离 Matrigel,然后加入 500μl 胰蛋白酶,放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后,用移液器多次吹打,从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化,在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS











