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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
500 ml
IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium)即Iscove改良的DMEM培养基,是Guilber 和Iscove在1976年设计的,用以培养红细胞前体细胞和巨噬细胞。IMDM培养基在DMEM培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙·酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,并用硝酸·钾代替了硝酸·铁,营养非常丰富,非常适合于快速增殖,高密度细胞培养。IMDM培养基不仅可以培养有特殊营养要求的细胞(如小鼠B淋巴细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T淋巴细胞以及各种杂交瘤细胞),还可以作为一些独特的无血清培养基的基础液。
【技术参数】
血清: 新生牛血清
酚红: Yes
L-谷氨酰胺: 0.584g/L
抗生素: 青霉素80U/ml;链霉素0.08mg/ML
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文献和实验0.2%Ⅱ型胶原酶,重悬沉淀,置于37℃恒温水浴锅中消化30min,每5min震荡一次; F. 消化结束,加入4mL M199完全培养基(含10%血清)终止消化;用200目不锈钢筛过滤,收集滤液,1200rpm离心5min; G. 沉淀用M199洗2次,室温离心,1200rpm,5min;弃上清,加入M199完全培养基(含5%FBS及1%双抗)重悬后接种于6孔塑料培养皿,置于37℃、5%CO2培养箱内静置培养;12-24h首次换液,随后每天观察,2-3天换液一次,待细胞生长融合
,之后将过滤后的悬液装到一个5ml 离心管 中,之后向过滤后的悬液中加入含10%新生牛血清的DMEM培养基到5ml, 于4℃冰箱中静置20min 。 6、 用吸管弃除悬液, 加入DMEM培养基至5ml, 以1000 转/ 分离心4min , 弃上清,如此反复3 次。 7、 最后离心完后再加入2ml含10%新生牛血清的DMEM完全培养基,收集肝细胞于培养瓶中,进行台盼蓝活 细胞计数 ;
培养基中,使用0.22微米的大滤膜一起过滤。 2、问:我怀疑我用的完全1640培养液被污染了,准备重新过滤消毒,过滤后是否需要补充胎牛血清?如需又如何补充? 答:完全1640培养液被污染了,如果是支原体的话,过滤没有作用,支原体可以通过滤膜。我们用1640液,都是配液后保留500ml,然后其他的分装100-200ml,现用现配因为血清比1640要贵,如果你想过滤的话,建议你加原比例血清,因为血清不会很容易通过滤膜。最主要的还是找到可能污染的原因。 3、问:加好了血清双抗的培养基由于污染了再过











