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PSD95 (D74D3) XP Rabbit mAb

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  • xy-3409
  • 2025年07月11日
  • 科研使用
  • Goat,Rabbit,Mouse
  • 人,大鼠,小鼠,兔
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    • 详细信息
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    • 形态

      液态/粉状

    • 保存条件

      -20℃保存

    • 克隆性

      多克隆

    • 标记物

      见说明书

    • 适应物种

      人,大鼠,小鼠,兔

    • 宿主

      Goat,Rabbit,Mouse

    • 应用范围

      科研使用

    • 浓度

      1mg/1ml

    • 靶点

      来电咨询

    产品细节图片1
    PSD95 (D74D3) XP Rabbit mAb提供各种一抗,二抗,单克隆,多克隆抗体以及不同蛋白的各种标记服务、各种纯化服务及载体蛋白连接服务,提供抗体、抗原亲和层析柱装配服务,欢迎来电咨询。
    步骤:1. 分离胶和积层胶,制胶板;
    注意:灌分离胶时不要加太多。
    2. 蛋白变性:准备蛋白样本,PSD95 (D74D3) XP Rabbit mAb加入等体积的2×上样Buffer稀释,置于沸水中煮10min(预染marker煮5min)
    3. 加样:每孔加入20~40μl样品
    4. 电泳:置于电泳槽中电泳45min,恒定电流90mA(2快板),如为一块板则电流为50 mA。
    5. 取出胶板,用切割刀修好胶;
    6. 将胶置于转膜液中浸泡;
    7. 按顺序放好下列物质:黑面→海绵→滤纸→胶→NC膜→滤纸(用吸管赶去气泡)→海绵;
    8. 置于转膜槽中于,黑面对黑面,加上冰块,加入转膜液;
    9. 装好电极,于恒定电压100V下,90min;
    10. 丽春红染膜;
    11. PSD95 (D74D3) XP Rabbit mAb用TBST洗去丽春红;
    12. 封闭:加入5%脱脂奶粉+TBST,常温摇床摇1h;
    13. 回收封闭液,加入一抗【一抗用5%BSA+TBS稀释】;
    14. 置于4℃摇床摇过夜;
    15. 回收一抗,TBST洗膜,10min,共3次;
    16. 加入二抗【二抗用5%脱脂奶粉+TBS稀释】,常温摇床摇1h;
    17. 回收二抗,TBST洗膜,10min,共3次;
    18. 将膜置于发光液中浸泡约1min;
    19. 将膜铺于曝光盒中,于暗室中曝光,洗胶片。
    大规模单克隆抗体的生产目前主要有两种方式,PSD95 (D74D3) XP Rabbit mAb一是腹水制备法,另一种是转瓶培养法。腹水制备法:将杂交瘤细胞株进行体外培养至一定浓度,再将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中,产生腹水,从腹水中纯化单克隆抗体。每只小鼠可以产生3~8 mL腹水,抗体含量可以达到1~10 mg/mL。腹水制备的周期为3~4周。腹水制备法具备成本低、产量高,时间快等优点,是目前主要的大规模抗体生产方式。转瓶培养法:将杂交瘤细胞进行大规模体外培养,从培养基中纯化抗体。抗体含量可以达到20~80 mg/L。转瓶制备法具有抗体品质高、不含小鼠杂蛋白,不含动物病毒等优点。
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      h)即可。2. 修复大法——不仅仅是「煮一煮」微波炉修复:简单易行效果好,CST 推荐使用微波炉完成修复。合适的修复液:根据抗体说明书使用合适的修复液。用柠檬酸修复后,切片需浸泡在修复液中,自然冷却;而用 EDTA 修复后,切片可直接从修复缸中取出,直接进行下一步。注:使用不同的修复方式和不同生产商的抗体检测人肺癌组织中 EGFR 的表达。第一排为 CST 的 EGF Receptor (D38B1) XP® Rabbit mAb(#4267),EDTA 的修复方式明显优于柠檬酸盐及胃蛋白

    • 手把手课程之 IHC 关键操作步骤

      。所以,我们建议使用微波炉或高压锅加热煮沸以达到最佳抗原修复效果。抗体:Phospho–Stat3 (Tyr705)(D3A7) XP. Rabbit mAb #9145样本:石蜡包埋人类肺部肿瘤样本煮沸设备:浴锅 (左),微波炉 (中),高压锅 (右)免疫染色—封闭在 IHC–P 中,我们建议在室温下在含有 Tween20 的 TBST 缓冲液和 5% 正常山羊血清 (NGS) 中封闭样品,时长 1 小时,以防止非特异性背景染色。在进行 IHC–F 时,在含有 0.3% Triton. X–100 的 1X

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