胶原包被96孔培养板,灭菌

最全面的MTT大汇总

这段做MTT走了不少弯路，后来看了园子里有许许多多的建议和指导，再做时结果好了很多，心里很是感激，于是把众多的帖子进行了总结，希望对后来者有所帮助！同时感谢各位前辈的良帖！！MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满

正常大鼠唾液腺上皮细胞的培养

鼠尾胶原溶液放入冰浴中的青霉素小瓶，加入0.5ml的10×DMEM培养基。混匀后，再加入浓度为0.34 mol/L的NaOH 0.1ml快速混合（鼠尾胶原液的配制比例，按鼠尾胶原液与10×DMEM及0.34 mol/L NaOH三者的体积比为8:1:1配制），并立即加到24孔培养板中（每孔0.8ml），于37℃下放置30min； 5. 将配好的鼠尾胶原溶液涂布在预先灭菌处理过的盖玻片上，使其凝固； 6. 将鼠尾胶原包被的盖玻片放入24孔培养板内，用D-Hanks液平衡1h，备用；

快速掌握无菌操作

商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌，但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作，避免污染。请始终使用适当的灭菌方法（如高压灭菌器、除菌过滤器）对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前，先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时，每只移液管只能使用一次，以避免