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北京拜尔迪生物技术有限公司
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文献和实验药物的培液,直接加MTT即可。如何清除上清百家争鸣:1.加DMSO前要把液体吸掉,但培养液里的紫色结晶可能会吸去,可在这之前先用平板离心机离心96孔板,2000r,5分钟,然后吸掉上清(如果是悬浮细胞,则推荐此法,悬浮细胞要离心2500rpm×10min.且其做MTT最好用圆底型96孔板,清除上清时注意不要把下面的结晶颗粒吸掉,建议各孔吸弃150-160ul即可)。2.我每次将MTT加入后,再孵育四个小时,然后用离心机离心1000G,5min。但是用*小心地吸上清,还是会将一小部分蓝色结晶吸出
细胞培养板的选择:细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。 平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择: 贴壁细胞一般用平底培养板 悬浮型细胞的培养一般用V型 U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 不同型状的板子自然有不同用途。平底的什么类型的细胞都可用﹐但当细胞
定OD值,可向每孔中加入10 μL 0.1 M HCl溶液或者1%(W/V)SDS溶液,并遮盖培养板避光室温保存。在24小时内吸光度不会发生变化。 7.结果分析: A.细胞存活率:将各测试孔的OD值减去本底OD值(空白组),各重复孔的OD值取平均数±SD。 细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100%。 B.求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。 五、经验总结 1.种板数:通过文献确认,看实验所用细胞别人是否做过,找出大致范围
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