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和序生物
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文献和实验鼠尾胶原溶液放入冰浴中的青霉素小瓶，加入0.5ml的10×DMEM培养基。混匀后，再加入浓度为0.34 mol/L的NaOH 0.1ml快速混合（鼠尾胶原液的配制比例，按鼠尾胶原液与10×DMEM及0.34 mol/L NaOH三者的体积比为8:1:1配制），并立即加到24孔培养板中（每孔0.8ml），于37℃下放置30min； 5. 将配好的鼠尾胶原溶液涂布在预先灭菌处理过的盖玻片上，使其凝固； 6. 将鼠尾胶原包被的盖玻片放入24孔培养板内，用D-Hanks液平衡1h，备用；
商品化试剂和培养基均经过严格的质量控制以保证其无菌，但它们在操作过程中可能被污染。请遵循以下指导原则进行无菌操作，避免污染。请始终使用适当的灭菌方法（如高压灭菌器、除菌过滤器）对实验室中配制的任何试剂、培养基或溶液进行灭菌。 无菌操作 请始终用 70% 乙醇擦拭双手和工作区。 将容器、培养瓶、培养板和培养皿放入细胞培养通风橱之前，先用 70% 乙醇擦拭其外部。 不要直接从试剂瓶或培养瓶中倾倒培养基和试剂。 使用无菌玻璃或一次性塑料移液管和移液器操作液体时，每只移液管只能使用一次，以避免
细胞可以省略该步骤。 2） 将细胞悬浮液收集到离心管中，在2-8℃下以1000×g离心5分钟，然后吸去培养基，用预冷PBS洗涤细胞3次。 3） 加入适量的预冷PBS（建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。在6孔培养板（约1×106个细胞）中，每个孔加入150-250μL的PBS来重悬细胞。 4） 使样本在-20℃或-80℃条件和室温条件下反复冻融，重复冻融过程数次，直至细胞完全裂解。也可以使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞。 5） 2-8℃下以1500×g离心10分钟，去除细胞碎片，收集
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