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- 服务名称:
酵母蛋白表达与纯化
- 提供商:
泓迅科技
服务详情
| 服务步骤 | 服务内容 | 交付内容 | 交付周期 |
|---|---|---|---|
| 基因合成(可选) |
|
|
10个工作日起 |
| 电转化及阳性克隆筛选(PCR方法) |
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2-3周 |
| 表达小试 |
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2-3周 |
| 目标蛋白放大培养 表达和纯化 |
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|
3-4周 |
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文献和实验GST表达融合蛋白 载体 pGEX-KG 大小:5006bp,氨苄青霉素抗性(Ampr),IPTG诱导表达 酶切位点:BamHI 930、SmaI 937、EcoRI 962、XbaI 966、NcoI 974、SalI 980、XhoI 985、SacI 992、HindIII 994 GST分子量: 构建pGEX-KG-YFG重组 质粒 1、分析所感兴趣的基因(your favorite
哺乳动物表达系统是适用于生成具有天然结构和活性的哺乳动物蛋白的首选表达平台,可以实现最高水平的翻译后加工,使蛋白质获得最佳功能活性,适合在最类似生理学的环境中研究特定蛋白质的功能。它常用于抗体和治疗性蛋白质以及人类功能细胞分析的蛋白质表达。 和稳定表达相比,哺乳动物瞬时表达系统可实现灵活且快速的蛋白质生产,可以在 1-2 周内生成大量蛋白质,适用于人或其他哺乳动物蛋白的表达,和大肠杆菌、酵母或昆虫细胞等宿主表达系统相比,可实现更天然的折叠和翻译后修饰——包括糖基化(图 1)。 图 1、哺乳动物蛋白表达
先来看下传统重组蛋白表达系统: 传统重组蛋白表达系统应对的挑战: 操作流程长:5天-4周时间 很多蛋白不能在细胞内成功表达 不可以改造目标蛋白 以大肠杆菌为代表的原核蛋白表达系统是常用的表达系统,具有表达量高和成本低的优点,但是蛋白质翻译后缺乏加工机制(比如形成二硫键和蛋白糖基化等),且很难保留生物活性。 以甲醇毕赤酵母为代表的酵母蛋白表达系统,具有表达量高,可诱导,糖基化机制接近真核生物等优点,但是部分蛋白产品易降解,表达量不可控。 哺乳动物细胞和昆虫
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