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- 提供商:
泓迅科技
- 服务名称:
昆虫细胞表达系统
杆状病毒-昆虫细胞表达服务优势
- 自主知识产权的NGTM Codon密码子优化技术,可显著提高蛋白表达水平及表达成功率
- 多种纯化方法,包括亲和层析、离子交换、疏水层析、凝胶过滤等,满足客户对不同纯度重组蛋白的需求
- 多种蛋白质鉴定可供选择:包括SDS-PAGE、Western Blot、MALDI-TOF、HPLC等。
服务详情
| 服务步骤 | 服务内容 | 交付内容 | 交付周期 |
|---|---|---|---|
| 基因合成(可选) |
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10个工作日起 |
| 杆状病毒制备 |
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3-5周 |
| 蛋白表达分析验证 |
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2-4周 |
| 大规模蛋白制备 |
|
|
1-2周 |
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文献和实验【专题讨论】杆状病毒——昆虫细胞蛋白表达系统,影响蛋白表达的因素?
不知道有多少人成功用杆状病毒——昆虫细胞表达系统成功进行过蛋白表达?我最近表达一段病毒的非结构蛋白nsp-6,构建的重组Bacmid质粒经PCR鉴定正确,可是进行表达时,却未见蛋白表达,同时进行的试剂盒对照(含CAT基因的重组细胞中则有较好的表达。 我听说约有70%的蛋白在原核表达系统中是不表达的,但不知道这样的情况会不会发生在我用的昆虫细胞表达系统,除了实验操作失误方面的原因,还有什么因素是不使蛋白表达的,请大家讨论一下。 下面是我的实验过程,请高手指教,同时希望也给新手一个指导
Nature:哈佛大学董民团队利用昆虫细胞全基因组 CRISPR 筛选,揭示杀虫毒素受体
细菌蛋白毒素是很多致病菌的主要武器,例如白喉毒素,炭疽毒素,肉毒杆菌毒素等等。近年来,全基因组 CRISPR/Cas9 筛选技术在哺乳动物细胞上得到广泛应用,成为研究这些针对人和动物的毒素和病原菌的主要实验方法。昆虫是地球上种类最繁多的动物,在整个生态链上起到至关重要的作用。在自然界中,存在许多专门靶向昆虫的细菌蛋白毒素, 有些已经被广泛地应用于农业害虫防治 。 现有的 CRISPR-Cas9 筛选技术依赖针对哺乳动物细胞的慢病毒转染系统,不适用在昆虫细胞上,大大限制了人们对针对昆虫的蛋白
在人细胞中快速、高水平地表达目的蛋白 在2至3个星期内即可获得高效价的病毒 无需噬斑纯化 靶细胞可以是分裂或不分裂的细胞(dividing/or nondividing cell) CLONTECH的Adeno-X™表达系统是一个特别 高效的腺病毒表达系统,用于在人细胞中瞬时及高水平地表达目的蛋白质。由于Adeno-X™病毒DNA中含有特别设计的克隆位点,你可以在2星期内获得高效价的腺病毒,其效率远高于其他腺病毒系统。 高效表达目的
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