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- Sigma-Aldrich
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1年
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suitable for release of physiologically active rat hepatocytes，Type IV，0.5-5.0 FALGPA units/mg solid，≥125 CDU/mg solid
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100⁺瓶
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上海睿安生物13611631389
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100mg/瓶
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Sigma货号C5138胶原酶IV现货(Type IV)(规格包装100mg/瓶)(目录价¥1107.40元/瓶)13611631389上海睿安生物
应用:
胶原酶已用于研究晚期糖基化终产物(AGE)所需的动脉组织的制备。该酶还与其他蛋白酶一起用于人肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮以及许多其他组织的解聚。它还可有效用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺的消化以及非实质肝细胞的分离。该酶经过了肝细胞释放的适用性测试，针对每只大鼠肝脏的100ml总体积中的浓度大约为1mg/mL。
来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于:
●制备用于消化肿瘤组织的胶原酶溶液；
●作为磷酸盐缓冲生理盐水的补充剂用于消化已切除的肠系膜脂肪组织；
●作为罗斯韦尔公园纪念研究所1640培养基(RPMI-1640)的补充剂用于消化结肠段；
●用于消化子宫内膜组织；
●制备用于消化去被膜的睾丸的酶A和酶B。
生化/生理作用:组织溶梭菌产生两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它在胶原三螺旋中的多个裂解位点进行裂解。梭菌胶原酶与气性坏疽中的细菌入侵有关。从组织中进行细胞的有效释放需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。每摩尔的胶原酶可被四克的钙原子(Ca²⁺)所激活。培养滤液中被认为至少含有7种分子量在68-130kDa之间的不同蛋白酶。最适pH为6.3-6.8。该酶通常用于消化组织样品中的结缔成分以释放单个细胞。胶原酶处理可引起某些细胞的死亡。通常，使用0.1至5mg/ml的浓度用于消化。反应时间可从15分钟至数小时，并在不引起过多细胞死亡的情况下达到令人满意的细胞解离效果。优选含有钙和BSA的Krebs Ringer缓冲液，而且Zn²⁺是活性所必需的。每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基Ji乙醇、谷胱甘肽、巯基Ji乙酸和8-羟基喹Kui啉抑制。
注意:以原包装形式，该产品在-20°C下可稳定保存6年。在37℃、50℃和-20℃下30天内，FALGPA或蛋白酶活性没有损失。如果分液(10mg/ml)形式快速冷冻并且在-20℃下冷冻保存，粗胶原酶的溶液可保持稳定。进一步的冻融步骤会破坏溶液稳定性。当在冰上保持时，该产品可在7小时内保持100％活性。
单位定义:一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0μ亮氨酸，5小时，pH7.4，37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0μmole呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5，37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6，25℃，每分钟水解1.0μmole BAEE。
制备说明:溶液通常是在TESCA缓冲液(含有50mM TES、0.36mM氯化钙，37℃时pH 7.4)中按1-2mg/ml进行制备。该产品还含有梭菌蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
同行评审论文
Role of LRP1 and ERK and cAMP signaling pathways in lactoferrin-induced lipolysis in mature rat adipocytes
Ikoma-Seki K, et al.
PLoS ONE, 10(10), e0141378-e0141378 (2015)
Preconditioning with intravenous colitic cell-free DNA prevents DSS-colitis by altering TLR9-associated gene expression profile
Muzes G, et al.
Digestive Diseases and Sciences, 59(12), 2935-2946 (2014)
Helicobacter pylori and its secreted immunomodulator VacA protect against anaphylaxis in experimental models of food allergy.
A Kyburz et al.
Clinical and experimental allergy : journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology, 47(10), 1331-1341 (2017-08-13)
Food allergy is an increasingly common health problem in Western populations. Epidemiological studies have suggested both positive and negative associations between food allergy and infection with the gastric bacterium Helicobacter pylori. The objective of this work was to investigate whether
Multiple liver insults synergize to accelerate experimental hepatocellular carcinoma.
James M Henderson et al.
Scientific reports, 8(1), 10283-10283 (2018-07-08)
The urgent unmet need for hepatocellular carcinoma (HCC) therapies is addressed here by characterising a novel mouse model of HCC in the context of ongoing liver damage and overnutrition. Male C57Bl/6J mice were treated with diethylnitrosamine (DEN) and thioacetamide (TAA)
Antisense oligonucleotide-mediated knockdown in mammary tumor organoids
Diermeier SD and Spector DL
Bio-protocol, 7(16) (2017)
一、╳※试剂※╳:
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应用:
胶原酶已用于研究晚期糖基化终产物(AGE)所需的动脉组织的制备。该酶还与其他蛋白酶一起用于人肿瘤、小鼠肾、人脑、肺上皮以及许多其他组织的解聚。它还可有效用于肝脏和肾脏的灌注研究、胰腺的消化以及非实质肝细胞的分离。该酶经过了肝细胞释放的适用性测试，针对每只大鼠肝脏的100ml总体积中的浓度大约为1mg/mL。
来自组织溶梭菌的胶原酶已被用于:
●制备用于消化肿瘤组织的胶原酶溶液；
●作为磷酸盐缓冲生理盐水的补充剂用于消化已切除的肠系膜脂肪组织；
●作为罗斯韦尔公园纪念研究所1640培养基(RPMI-1640)的补充剂用于消化结肠段；
●用于消化子宫内膜组织；
●制备用于消化去被膜的睾丸的酶A和酶B。
生化/生理作用:组织溶梭菌产生两类胶原酶。梭菌胶原酶比哺乳动物胶原酶更高效。它在胶原三螺旋中的多个裂解位点进行裂解。梭菌胶原酶与气性坏疽中的细菌入侵有关。从组织中进行细胞的有效释放需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。每摩尔的胶原酶可被四克的钙原子(Ca²⁺)所激活。培养滤液中被认为至少含有7种分子量在68-130kDa之间的不同蛋白酶。最适pH为6.3-6.8。该酶通常用于消化组织样品中的结缔成分以释放单个细胞。胶原酶处理可引起某些细胞的死亡。通常，使用0.1至5mg/ml的浓度用于消化。反应时间可从15分钟至数小时，并在不引起过多细胞死亡的情况下达到令人满意的细胞解离效果。优选含有钙和BSA的Krebs Ringer缓冲液，而且Zn²⁺是活性所必需的。每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基Ji乙醇、谷胱甘肽、巯基Ji乙酸和8-羟基喹Kui啉抑制。
注意:以原包装形式，该产品在-20°C下可稳定保存6年。在37℃、50℃和-20℃下30天内，FALGPA或蛋白酶活性没有损失。如果分液(10mg/ml)形式快速冷冻并且在-20℃下冷冻保存，粗胶原酶的溶液可保持稳定。进一步的冻融步骤会破坏溶液稳定性。当在冰上保持时，该产品可在7小时内保持100％活性。
单位定义:一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0μ亮氨酸，5小时，pH7.4，37℃，在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个FALGPA水解单元每分钟，25℃，水解1.0μmole呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白，产生颜色和1.0μmole 酪氨酸每5小时，pH7.5，37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下，pH7.6，25℃，每分钟水解1.0μmole BAEE。
制备说明:溶液通常是在TESCA缓冲液(含有50mM TES、0.36mM氯化钙，37℃时pH 7.4)中按1-2mg/ml进行制备。该产品还含有梭菌蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
同行评审论文
Role of LRP1 and ERK and cAMP signaling pathways in lactoferrin-induced lipolysis in mature rat adipocytes
Ikoma-Seki K, et al.
PLoS ONE, 10(10), e0141378-e0141378 (2015)
Preconditioning with intravenous colitic cell-free DNA prevents DSS-colitis by altering TLR9-associated gene expression profile
Muzes G, et al.
Digestive Diseases and Sciences, 59(12), 2935-2946 (2014)
Helicobacter pylori and its secreted immunomodulator VacA protect against anaphylaxis in experimental models of food allergy.
A Kyburz et al.
Clinical and experimental allergy : journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology, 47(10), 1331-1341 (2017-08-13)
Food allergy is an increasingly common health problem in Western populations. Epidemiological studies have suggested both positive and negative associations between food allergy and infection with the gastric bacterium Helicobacter pylori. The objective of this work was to investigate whether
Multiple liver insults synergize to accelerate experimental hepatocellular carcinoma.
James M Henderson et al.
Scientific reports, 8(1), 10283-10283 (2018-07-08)
The urgent unmet need for hepatocellular carcinoma (HCC) therapies is addressed here by characterising a novel mouse model of HCC in the context of ongoing liver damage and overnutrition. Male C57Bl/6J mice were treated with diethylnitrosamine (DEN) and thioacetamide (TAA)
Antisense oligonucleotide-mediated knockdown in mammary tumor organoids
Diermeier SD and Spector DL
Bio-protocol, 7(16) (2017)
一、╳※试剂※╳:
相关实验
Combined 3C-ChIP-Cloning (6C) Assay: A Tool to Unravel Protein-Mediated Genome Architecture
. Repeat Steps 25.iii-25.iv. vii. Resuspend the beads in 1 mL of 0.5% BSA in PBS. Rotate end-over-end overnight at 4°C. 26. Add 100 µL of the blocked magnetic bead solution to each immunoprecipitate sample
实验采用10只2-3周龄SD大鼠，雌雄均可，体重40~60 g。 1.2 试剂 纤连蛋白（fibronectin），Ⅳ型胶原，鼠尾胶，葡聚糖（dextran，分子量100~200kDa），DNA酶Ⅰ（DNaseⅠ）购自Sigma公司；D-Hanks液，PBS，10×PBS按配方自制；Ⅱ型胶原酶购自Worthington公司；明胶，牛血清白蛋白（BSA），HEPES购自Amresco公司；Percoll购自Amersham Biosciences；DMEM（高糖）购自Gibco BRL公司；肝素
Replication timing by density transfer
. (I add 0.1 mg/ml ampicillin if I'm feeling paranoid.) The doubling time of RM14-3a is ~ 2.6 hr at 23o C in glucose and 6-8 hr (depending on aeration) in acetate--longer if you're selecting for a plasmid. RM14-3a is MATa, cdc7-1ts , bar1, trp1-289
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