Sigma货号C7657胶原蛋白酶Collagenase Type XI上海睿安生物13611631389微信同号
说明
应用:
已有研究以梭状二肽酶A(Clostridiopeptidase A)为实验材料,研究梭状二肽酶A(Clostridiopeptidase A)对新生儿腹腔坏死组织的抑制作用,并评价其对大鼠术后腹腔粘连模型的影响。梭菌肽酶A也在一项研究中被用来描述一种基于MALDI-TOF(基质辅助激光解吸/电离飞行时间)质谱(MS)法评估胶原蛋白消化后少量胶原蛋白的定量方法。
本产品已用于胰腺导管腺癌细胞系的分离和胰腺成纤维细胞的组织培养。
包装:25mg、100mg、500mg;1g、5g
生化/生理作用
组织细胞的有效释放需要胶原酶和中性蛋白酶的作用。每摩尔胶原酶由4g原子钙(Ca
2+) 酶激活。培养滤液被认为含有分子量在68-130 kDa之间的至少7种不同的蛋白酶。最佳pH为6.3-8.8。这种酶通常用于消化组织样本中的结缔组织成分,以释放单个细胞。胶原酶治疗会导致一些细胞死亡。通常,消化浓度从0.1到5mg/ml不等。为产生令人满意的细胞解离效率并不会造成太多的细胞死亡,其反应时间从15分钟到几个小时不等。最好使用含有钙和BSA的Krebs Ringer缓冲液,Zn
2+是活性必需的。这种酶经过测试,在大约1mg/ml浓度下可使肝细胞释放,每个大鼠肝脏的总体积为100ml。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯(qiú)基乙醇、谷胱甘肽、巯(qiú)基乙酸和8-羟基喹(kuí)啉抑制。
质量
也具有梭菌蛋白酶、非特异性中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。
单位定义
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0μmole BAEE。
制备说明:可通过向含有0.36mM氯化钙(TESCA),pH为7.4,37℃的50mM TES缓冲液中溶解0.05-0.1mg/ml的胶原酶而制备贮存液。