Chloramphenicol

产品简介：对于Chloramphenicol培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的Chloramphenicol，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的Chloramphenicol。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的Chloramphenicol培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液Chloramphenicol放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养Chloramphenicol，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在Chloramphenicol培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
Chloramphenicol同类产品推荐：xy11648 大肠埃氏菌
xy11649 大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种
xy11650 痤疮丙酸杆菌
xy11651 脆弱拟杆菌
xy11652 刺孢吸水链霉菌昆明变种
xy11653 刺孢吸水链霉菌
xy11654 创伤弧菌
xy11655 串珠镰刀菌
xy11656 串珠镰孢
xy11657 出芽短梗霉
xy11658 出血性大肠埃希氏菌
xy11659 臭曲霉
xy11660 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌
xy11661 成纤维细胞,PA317细胞
xy11662 成纤维细胞,L929细胞
xy11663 成骨肉瘤细胞,Saos-2细胞
xy11664 潮湿纤维单胞菌
xy11665 肠炎沙门氏菌肠炎亚种
xy11666 肠炎沙门氏菌
xy11667 肠埃希氏菌
xy11668 长双歧杆菌
xy11669 长根菇（长根奥德磨）
xy11670 长臂猿淋巴瘤 MLA-144细胞
xy11671 长鼻袋鼠肾细胞,Pt K1 (NBL-3)细胞
xy11672 产朊假丝酵母
xy11673 产气荚膜梭菌
xy11674 产气肠杆菌
xy11675 产黄纤维单胞菌
xy11676 产EBV的绒猴白细胞,B95-8细胞
xy11677 草鱼肾脏细胞,CIK细胞
xy11678 草鱼肝脏细胞,L8824细胞
xy11679 仓鼠肾成纤维细胞,BHK-21细胞
xy11680 仓鼠肾成纤维细胞,BHK-21 [C-13]细胞,
xy11681 仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1细胞,
xy11682 仓鼠卵巢细胞亚株 CHO-K1-EGFP细胞
xy11683 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr细胞,
xy11684 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr-细胞
xy11685 仓鼠卵巢细胞,Lec1细胞,
xy11686 仓鼠卵巢细胞,CHO细胞
xy11687 仓鼠肺细胞,V79细胞
xy11688 仓鼠肺细胞,R1610细胞
xy11689 仓鼠肺细胞,CHL细胞
xy11690 仓鼠/小鼠杂交瘤细胞,145-2C11细胞
xy11691 菜青虫卵巢细胞,Pr-HNV8细胞
以上方法主要是针对贴壁生长的Chloramphenicol，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止Chloramphenicol脱落。