线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)

线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) (Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1)是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential) ∆Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体(monomer)，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。JC-1检测线粒体膜电位的效果参考图1。
图1. 本试剂盒检测NRK-52E细胞(大鼠肾小管上皮细胞)线粒体膜电位的效果图。正常的NRK-52E细胞线粒体中JC-1以聚合物形式存在，呈明亮的红色荧光，细胞中的绿色荧光非常弱；使用CCCP处理使线粒体膜电位下降后，JC-1便不能以聚合物形式存在线粒体基质中，此时线粒体内红色荧光强度显著降低，而细胞浆中的绿色荧光显著增强。
JC-1单体的最大激发波长为514nm，最大发射波长为529nm；JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。JC-1单体和聚合物的激发光和发射光光谱参考图2。
图2.JC-1单体和聚合物的激发光和发射光光谱。本试剂盒提供了CCCP作为诱导线粒体膜电位下降的阳性对照。
对于六孔板中的样品，本试剂盒共可以检测100个样品；对于12孔中的样品，本试剂盒共可以检测200个样品。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
C2006-1	JC-1(200X)	100µl/管，共5管
C2006-2	超纯水	90ml
C2006-3	JC-1染色缓冲液(5X)	80ml
C2006-4	CCCP(10mM)	20µl
－	说明书	1份

保存条件：
-20℃保存。JC-1(200X)需避光保存，并尽量避免反复冻融。超纯水和JC-1染色缓冲液(5X)也可4℃保存。
注意事项：
JC-1(200X)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
必须先把JC-1(200X)用试剂盒提供的超纯水充分溶解混匀后，才可以加入JC-1染色缓冲液(5X)。不可先配制JC-1染色缓冲液(1X)再加入JC-1(200X)，这样JC-1会很难充分溶解，会严重影响后续的检测。
装载完JC-1后用JC-1染色缓冲液(1X)洗涤时，使JC-1染色缓冲液(1X)保持4℃左右，此时的洗涤效果较好。
JC-1探针装载完并洗涤后尽量在30分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
请勿把JC-1染色缓冲液(5X)全部配制成JC-1染色缓冲液(1X)，本试剂盒使用过程中需直接使用JC-1染色缓冲液(5X)。
如果发现JC-1染色缓冲液(5X)中有沉淀，必须全部溶解后才能使用，为促进溶解可以在37℃加热。
CCCP为线粒体电子传递链抑制剂，对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。