Stemolecule™ Wnt Signaling Pat

产品简介：对于Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
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xy-0633xy CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4)周期素依赖性激酶4(抗原)
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xy-0651xy Connexin-43(Cx43)间隙连接蛋白43(多肽片断抗原)
xy-0652xy Connexin-45(CX45)间隙连接蛋白45(抗原)
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xy-0732xy COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2)前列腺素氧化环化酶2(抗原)
xy-0697xy c-phycocyanin(C-PC)C-藻蓝素(藻蓝蛋白)
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xy-0282xy Cyclin C周期素 C(抗原)
xy-0791xy CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP)降钙素基因相关肽
xy-0614xy CULLIN (Cdc53/CUL)
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xy-0488xy CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor)脱羧酶蛋白体36 cxorf36抗原
xy-0399xy Deltex-1(DTX1) (Deltex protein 1)抗原
xy-0428xy DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT)DISC1 N端抗原
xy-0430xy DISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT)DISC1 C端抗原
xy-0421xy DR3/TRAMP (death receptor-3)DR3 死亡受体（抗原）
xy-0714xy E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16)人乳头瘤病毒16型E7蛋白抗原
xy-0165xy EGF-R (Epidemal growth factor receptor)表皮生长因子受体（抗原）
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xy-0675xy FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2)成纤维细胞生长因子受体2抗原
以上方法主要是针对贴壁生长的Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止Stemolecule™ Wnt Signaling Pathway Set脱落。