Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP

产品简介：对于Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2同类产品推荐：xy-0604xy galectin 9 半乳糖凝集素9（抗原）
xy-0830xy Oct-4胚胎干细胞关键蛋白(多肽)
xy-0026xy OPN(osteopontin)骨桥蛋白（抗原）
xy-0740xy P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)抑癌基因p16（抗原）
xy-0741xy p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子之一（抗原）
xy-0742xy p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)p27(抗原)
xy-0723xy P63 proteinP63 肿瘤抑制基因（抗原）
xy-0431xy OPG(Osteoprotegerin)护骨素(多肽抗原)
xy-0747xy OPGL (Osteoprotegerin ligand)骨保护蛋白配体(抗原)
xy-0427xy P311 protein增生性瘢痕相关蛋白（抗原）
xy-0769xy PARP(poly ADP-ribose polymerase)多腺苷二磷酸多聚酶抗原
xy-0270xy Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human内脂素/内脏脂肪素（人：N端多肽）、内脏脂肪素、 又称：前B细胞克隆增强因子、内肥素、腹脂素
xy-0272xy Visfatin-1 (PBEF1)(NT) 内脂素/内脏脂肪素
xy-0273xy PBEF (CT)内脂素/B细胞克隆增强因子
xy-0731xy PEDF (pigment epithelium-derived factor)色素上皮源性因子(多肽抗原）
xy-0739xy PAP2c (Phosphatidic acid phosphatase 2c)磷脂酸磷酸酶2C（抗原）
xy-0689xy PEPT1 (Peptide-transporters 1)肠道肽转运蛋白(小肽转运蛋白)多肽
xy-0748xy PTEN/MMAC1一种肿瘤抑制基因抗原
xy-0420xy PIBF(progesterone induced blocking factor)孕激素诱导阻断因子(抗原)
xy-0665xy PIWIL1(piwi-like 1)piwi 样1蛋白(抗原)
xy-0530xy PPAR Gamma (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma)过氧化酶活化增生受体γ（抗原）
xy-0490xy PP2Ac蛋白磷酸酶4(抗原)
xy-0378xy Runx3一种新发现的抑癌基因(抗原)
xy-0278xy RRAD (Ras-related associated with diabetes )RRAD(多肽抗原)
xy-0783xy SDF-1/CXCL12 (stromal cell derived factor-1)基质细胞衍生因子-1(抗原)
xy-0211xy shank1(SH3 and multiple anleyrin repead domins protein 1)shank1多肽抗原
xy-0444xy slc22A17 (solute carrier famili 22)溶质转运蛋白家族22成员17(多肽抗原)
xy-0496xy SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5)可溶性载质转运蛋白SLC24A5（抗原）
xy-0473xy solute carrier family 1溶质携带物家族-1(抗原)
xy-0478xy SLC6A4 (solute carrier family 6)钾依赖钠钙交换蛋白6(抗原)
xy-0615xy Survivin细胞凋亡抑制因子的一种（抗原）
xy-0635xy SSA/RO (ribonucleoprotein complex,RNP)核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)
xy-0276xy SSB/La干燥症SSB/La蛋白
xy-0718xy Smad2(Mothers against decapentaplegic homolog 2)Smad 2(抗原)
xy-0717xy SPAG5/map126 精子相关抗原5(多肽抗原)
xy-0770xy SP-A (pulmonary surfactant-associated glycoprotein A)肺表面活性蛋白A(抗原)
以上方法主要是针对贴壁生长的Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止Stemolecule™ Wnt Inhibitor IWP-2脱落。