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- cDNA克隆包括22000个人源ORF克隆，种类齐全，覆盖面广，可应用于各种表达系统。
- 2026年04月27日
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cDNA克隆
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上海吉凯基因
cDNA克隆
l Transfect-ready系列包含22,000个人源ORF克隆,持续增加中……可直接用于哺乳动物细胞系转染。 融合有Flag标签及EGFP荧光标记，便于表达检测。
l Express-ready系列可直接用于哺乳动物细胞系转染。已经过表达检测（Western Blot 或荧光检测）。 可定制，100余种工具载体满足各种外源表达需求……
l Infect-ready系列高滴度慢病毒颗粒（108~109）可应用于各种哺乳动物细胞系、原代细胞、干细胞及动物组织细胞体内感染…… 可方便快捷融合各种报告基因示踪目的蛋白表达。
cDNA克隆相关应用
相关产品基因调取基因亚克隆基因突变体构建cDNA克隆对照无内毒素质粒抽提上海吉凯基因医学科技股份有限公司 地址：上海张江高科技园区爱迪生路332号 邮编：201203 全国热线：4006210302 售前顾问：17600138744；13818254889 邮箱：service@genechem.com.cn URL：https://www.genechem.com.cn/ 
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文献和实验一．原理 (1) 以目的mRNA 为模板，使用Oligo dT-3sites Adaptor Primer 进行反转录反应，合成1st Strand cDNA。 (2) 使用含有KpnI、XbaI、BamH I 酶切位点的上游特异性引物和3sites Adaptor Primer进行PCR反应。 (3) 使用限制性酶（KpnI、XbaI或BamH I）对PCR产物进行酶切反应。 (4) 选用适当载体克隆
PCR 产物在 1% 琼脂糖凝胶上进行电泳分离。回收纯化电泳片段克隆到pMD-18T 载体，进行鉴定和序列分析（方法同实验六、实验七）。 (6)获得cDNA 5’末端序列后，将其与cDNA 的核心片断及3’末端序进行拼接。这就获得了cDNA的全序列。
研究某个 gene 的功能通常要做相关的功能实验，常用的手段有 gain-of-function，涉及 gene 的过表达，在下文中即将讲述；还有 loss-of-function， 通常涉及 gene 的 knock-out 或 konck-down，暂且不提。今天准备跟大家分享一下如何成功地用传统酶切酶连的方法克隆某 gene 的经验，虽然现在同源重组的方法已经越来越广泛地应用到科研中，属于 technology based innovation，给实验带来极大便利。但是传统的克隆
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