WZ4002（Mutant-selective EGFR i

产品简介：对于WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)培养防止污染的措施等注意事项，相信各位培养细胞老师都知道的差不多，其实实际情况也就是那些步骤了，主要就是在于各位操作的娴熟程度了。所以这个预防还是在于大家的锻炼。
对于贴壁生长的WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)，相对来说比较简单但很麻烦。以下我主要讨论贴壁生长的WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)。
在讨论之前，大家首先要有一个概念，即洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
处理方法如下：
1）.将污染的WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，将换好新的培养液WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；预防为主！！所以处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！尤其注意血清的质量！这个是主要来源。一般建议用北美血清。
WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)同类产品推荐：xy10379 肾透明细胞腺癌细胞,786-O [786-0]细胞
xy10380 肾上腺嗜铬细胞瘤细胞,PC-12细胞
xy10381 肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞
xy10382 肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移) KP-N-NS细胞
xy10383 肾上腺皮质腺癌细胞,SW-13细胞
xy10384 肾上腺皮质细胞,Y1细胞
xy10385 肾癌细胞,OS-RC-2细胞
xy10386 神经上皮瘤细胞,SK-N-MC细胞
xy10387 神经母细胞瘤细胞,SK-N-SH细胞
xy10388 神经母细胞瘤细胞,SH-SY5Y细胞
xy10389 神经胶质瘤细胞, SHG-44细胞
xy10390 神经胶质瘤细胞, CRT细胞
xy10391 深红酵母
xy10392 上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌 GNM细胞
xy10393 伤寒沙门氏菌
xy10394 珊瑚色诺卡氏菌
xy10395 珊瑚链霉菌
xy10396 沙链霉菌
xy10397 散鳞镜鲤尾鳍细胞
xy10398 瑞士乳杆菌
xy10399 乳腺肿瘤细胞,C127细胞
xy10400 乳腺腺癌细胞,SK-BR-3细胞
xy10401 乳腺细胞,Hs 578Bs细胞
xy10402 乳腺管癌细胞,T-47D细胞
xy10403 乳腺管癌细胞,BT549细胞
xy10404 乳腺管癌 T47-D细胞,
xy10405 乳腺癌细胞,ZR-75-30细胞
xy10406 乳腺癌细胞,ZR-75-1细胞
xy10407 乳腺癌细胞,SHZ-88细胞
xy10408 乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞
xy10409 乳腺癌细胞,MDA-MB-453细胞
xy10410 乳腺癌细胞,MDA-MB-435S细胞
xy10411 乳腺癌细胞,MDA-MB-231细胞
xy10412 乳腺癌细胞,MCF7细胞
xy10413 乳腺癌细胞,Hs 578T细胞
xy10414 乳腺癌细胞,Bcap-37细胞
xy10415 乳链球菌
xy10416 溶组织梭菌Clostridium histolyticum
xy10417 绒猴EBV转化的白细胞,B95-8细胞,
xy10418 人组织细胞淋巴瘤细胞,U937细胞,
xy10419 人子宫内膜腺癌细胞,KLE细胞
xy10420 人子宫内膜腺癌细胞,JEC细胞
xy10421 人子宫内膜腺癌细胞,HEC-A-1细胞
以上方法主要是针对贴壁生长的WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止WZ4002（Mutant-selective EGFR inhibitor(L858R,T790M)脱落。