Roche货号11088815001-500mg胶原酶B上海

Roche货号11088815001-500mg胶原酶B from Clostridium histolyticum上海睿安生物13611631389

一般描述

通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干从溶组织梭菌培养物制备胶原酶B。来自溶组织梭菌的胶原酶是一种胶原分解酶。它与胶原蛋白样物质相互作用，负责将胶原蛋白降解成小肽。它广泛用于分解许多类型的组织(如肺，心脏，肌肉，骨骼，脂肪组织，肝脏，肾脏，软骨，乳腺，胎盘，血管，脑，肿瘤)和单一的准备——用于建立原代细胞培养系统的细胞悬浮液。当产量和活力很重要时，建议使用胶原酶B。

特异性

胶原酶降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。

应用

来自 Roche的梭菌胶原酶已用于制备来自许多类型组织的细胞，例如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。然而，每批酶对于破坏特定细胞的适合性。组织应根据经验确定。
胶原酶B已用于制备来自小鼠主动脉和结肠直肠癌组织的细胞。

产品规格

酶活性:
胶原酶活性:>0.15U/mg(根据Wünsch)(+25℃，4-苯基-偶氮苄基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染酶活性:胰蛋白酶，梭菌蛋白酶和总量蛋白水解活性
胶原酶B具有正常至高的胶原酶活性和高于平均的梭菌蛋白酶活性(通常>10U/mg)。

抑制剂:
胶原酶抑制剂:EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-巯qiú基乙醇
胶原酶不受血清抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂:TLCK
胰蛋白酶抑制剂:抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂(蛋清，大豆)、血清

单位定义

来自Roche的胶原酶以Wünsch单位进行测定(每分钟在+25°C下用Wünsch底物形成1μmol产物)。
通常，胶原酶活性以 Mandl 单位给出(在+37℃下5小时内从胶原释放的1μmol亮氨酸)。 
遗憾的是，两个活性单位之间没有一致的转换因子，因为Mandl 单位部分取决于胶原酶制剂中污染蛋白酶的浓度，这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂实际上在Mandl单元中比粗制剂具有更低的比活性。梭菌制剂通常给出约1:1800的转换因子(例如，特定批次的梭菌胶原酶含有约0.15 Wünsch U/mg和250Mandl U/mg)。

制备说明

激活剂:Ca²⁺
工作浓度:0.5至2.5mg/ml
储存条件(工作溶液):-15至-25°C
Roche 建议仅重悬立即使用所需的冻干量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了，所以要避免反复冻融。

重悬:在任何平衡盐溶液(例如HBSS)中重悬

其他说明:仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

同行评审论文(部分文献)

Reversibility of experimental rabbit liver cirrhosis by portal collagenase administration.

Bo Jin et al.

Laboratory investigation; a journal of technical methods and pathology, 85(8), 992-1002 (2005-06-21)

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Genetic deletion of chemokine receptor Ccr7 exacerbates atherogenesis in ApoE-deficient mice.

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Cardiovascular research, 97(3), 580-588 (2012-11-28)

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