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- 美国ATCC
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- 2025年07月13日
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1000
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上海钰博
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- 物种来源：
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- 免疫类型：
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- 细胞形态：
上皮样
- 是否是肿瘤细胞：
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- 器官来源：
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- 运输方式：
干冰运输
- 生长状态：
贴壁生长
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
Hoechst 33258 产品性质
中文名称（Chinese Synonym）
二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑
英文名称（English Synonym）
2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride; bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式（Molecular Formula）
C25H24N6O·3HCl
分子量（Molecular Weight）
533.88
CAS号（CAS NO.）
23491-45-4
荧光光谱（Fluorescence Spectral）
Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 荧光可用氙气灯，泵弧灯或者UV激光激发；可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。
纯度（Purity）
≥95%（HPLC）
结构（Structure）
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。
配制母液
Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
Hoechst 33258注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备10～50µM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的细胞或组织染色：
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
a) 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
b) 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
c) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
3. 活细胞或组织染色：
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。
c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
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文献和实验Hoechst 33258染色1．原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮
Testing for Mycoplasma by Indirect DNA Stain (Hoechst 33258 stain)
Materials Media� pre-warmed to 37ºC (refer to the ECACC Cell Line Data Sheet for the correct medium) 70% ethanol in water (Prod. No. R8382 ) Methanol (Prod. No. 175 ) Acetic Acid Glacial (Prod. No. A6283 ) Hoechst 33258
韶光逐浅 我想问一下Hoechst凋亡染色试剂盒国产的哪个公司的好啊？ yunitongxing 原装进口试剂 韶光逐浅 好的，多谢啦 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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