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1
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上海信裕
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit产品描述
细胞培养是生命科学研究中常用的实验手段。不像其它常用的实验方法，细胞培养是一个动态的连续过程，细胞通常会对操作失误或污染物有所反应，这些反应往往表现出不正常的细胞状态或培养基外观。如果受到支原体污染时，细胞形态较之无明显变化，极易被忽视，往往直到污染非常严重时才能发现。受污染的细胞膜上可能有几百个支原体，这些支原体竞争营养并释放有毒的代谢产物，严重影响实验结果。
研究表明，至少二十多种支原体能污染细胞，其中最常见的有：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）、发酵支原体（M. fermentans）、人型支原体（M. hominis）、唾液支原体（M.salivarium）、肺支原体（M.pulmonis）和梨支原体（M.pirum）等。培养细胞的支原体污染率在4%-92%不等，其污染来源包括工作环境、操作者本身（一些支原体是人体的正常菌群）、培养基、血清、细胞交叉污染、实验器材和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
确认细胞培养过程中出现问题的潜在原因是一项困难且耗时的任务，在细胞培养中，任何突然的变化都应该被怀疑，同时良好的试验规范和定期检测支原体污染也十分必要。支原体检测的方法有很多种，如直接培养、DNA荧光染色、ELISA和PCR法等。
GMyc-PCR支原体检测试剂盒主要采用PCR方法对各种生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。它综合了几个优势：灵敏、特异、快速并且可以用直接用细胞培养上清液检测。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit产品组分
编号
组分
产品编号/规格
40601ES10
40601ES20
40601-A
GMyc-1st PCR Mix
250µl
2×250µl
40601-B
GMyc-2nd PCR Mix
250µl
2×250µl
40601-C
Positive Control Template注1，2
20µl
20µl
【注1】：长期不用时，可-80℃冷冻保存。
【注2】：PCR反应极其灵敏，为防止假阳性，加样时，最后加阳性对照。
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。
实验流程
此PCR反应为巢式PCR，第一轮PCR结束后，取其反应产物为第二轮PCR模板。根据两轮PCR产物电泳条带之有无及片
段大小来分析结果。贴壁细胞培养3-6天后，直接取其上清液进行PCR反应。为排除细胞培养基抑制PCR反应，阳性对照中需加入等量的细胞上清液。悬浮细胞不能作为样品直接检测，会干扰PCR反应，需提取DNA并进行PCR。
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
xy1302 RDF-a 大鼠皮肤成纤维细胞-成年 Rat Dermal Fibroblasts-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1303 RLF 大鼠淋巴成纤维细胞 Rat Lymphatic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1304 RPAEpiC 大鼠肺泡上皮细胞 Rat Pulmonary Alveolar Epithelial Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
xy1305 RPF 大鼠肺成纤维细胞 Rat Pulmonary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1306 RRTEpiC 大鼠肾小管上皮细胞 Rat Renal Tubular Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1307 RRMC 大鼠肾系膜细胞 Rat Renal Mesangial Cells 5 x 10^5 cells per 1ml ATCC
xy1308 RHSteC 大鼠肝星状细胞 Rat Hepatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1309 RHMa 大鼠肝巨噬细胞 Rat Hepatic Macrophage 1x10^6 cells/vial ATCC
xy1310 RASMC 大鼠主动脉平滑肌细胞 Rat Aortic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1311 RCM 大鼠心肌细胞 Rat Cardiac Myocytes 1 x 10^6 cells/vial ATCC
xy1312 RCF 心肌成纤维细胞 Rat Cardiac Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1313 RLEpiC 大鼠晶状体上皮细胞 Rat Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1314 RMSC-bm 大鼠骨髓间充质干细胞 Rat Mesenchymal Stem Cells-bone marrow 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1315 RPMSC 大鼠肺间充质干细胞 Rat Pulmonary Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1316 ATCC
xy1317 猪细胞系统 ATCC
xy1318 PRA 猪视网膜星形胶质细胞 Porcine Retinal Astrocytes 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1319 PCEpiC 猪角膜上皮细胞 Porcine Corneal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1320 PRPEpiC 猪视网膜色素上皮细胞 Porcine Retinal Pigment Epithelial Cells 6 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1321 PLEpiC 猪晶状体上皮细胞 Porcine Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1322 ATCC
xy1323 马和狗细胞系统 ATCC
xy1324 HMSC-ad 马间充质干细胞--脂肪 Horse Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1325 EMSC-ad 马间充质干细胞--脂肪 Equine Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1326 DMSC-ad 狗间充质干细胞--脂肪 Dog Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1327 ATCC
xy1328 特殊培养基 ATCC
xy1329 低血清培养基 ATCC
xy1330 ECM 内皮细胞培养基 Endothelial Cell Medium 500 ml ATCC
xy1331 ECM-b 内皮细胞培养基-基础 Endothelial Cell Medium-basal 500ml ATCC
xy1332 SMCM 平滑肌细胞培养基 Smooth Muscle Cell Medium 500ml ATCC
xy1333 SMCM-b 平滑肌细胞培养基-基础 Smooth Muscle Cell Medium-basal 500 ml ATCC
xy1334 PM 周边细胞培养基 Pericyte Medium 500 ml ATCC
xy1335 MenCM 脑膜细胞培养基 Meningeal Cell Medium 500 ml ATCC
xy1336 NPCM 神经前体细胞培养基 Neural Precursor Cell Medium 500 ml ATCC
细胞培养是生命科学研究中常用的实验手段。不像其它常用的实验方法，细胞培养是一个动态的连续过程，细胞通常会对操作失误或污染物有所反应，这些反应往往表现出不正常的细胞状态或培养基外观。如果受到支原体污染时，细胞形态较之无明显变化，极易被忽视，往往直到污染非常严重时才能发现。受污染的细胞膜上可能有几百个支原体，这些支原体竞争营养并释放有毒的代谢产物，严重影响实验结果。
研究表明，至少二十多种支原体能污染细胞，其中最常见的有：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）、发酵支原体（M. fermentans）、人型支原体（M. hominis）、唾液支原体（M.salivarium）、肺支原体（M.pulmonis）和梨支原体（M.pirum）等。培养细胞的支原体污染率在4%-92%不等，其污染来源包括工作环境、操作者本身（一些支原体是人体的正常菌群）、培养基、血清、细胞交叉污染、实验器材和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。
确认细胞培养过程中出现问题的潜在原因是一项困难且耗时的任务，在细胞培养中，任何突然的变化都应该被怀疑，同时良好的试验规范和定期检测支原体污染也十分必要。支原体检测的方法有很多种，如直接培养、DNA荧光染色、ELISA和PCR法等。
GMyc-PCR支原体检测试剂盒主要采用PCR方法对各种生物材料（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。它综合了几个优势：灵敏、特异、快速并且可以用直接用细胞培养上清液检测。本制品通过PCR方法检测培养细胞等生物材料中的支原体，所用引物为根据支原体16S-23S rRNA序列保守区域设计，只特异性扩增支原体DNA，检出灵敏度与特异性均较高。PCR扩增及电泳分析只需数个小时，操作方便简单。
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit产品组分
编号
组分
产品编号/规格
40601ES10
40601ES20
40601-A
GMyc-1st PCR Mix
250µl
2×250µl
40601-B
GMyc-2nd PCR Mix
250µl
2×250µl
40601-C
Positive Control Template注1，2
20µl
20µl
【注1】：长期不用时，可-80℃冷冻保存。
【注2】：PCR反应极其灵敏，为防止假阳性，加样时，最后加阳性对照。
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。
实验流程
此PCR反应为巢式PCR，第一轮PCR结束后，取其反应产物为第二轮PCR模板。根据两轮PCR产物电泳条带之有无及片
段大小来分析结果。贴壁细胞培养3-6天后，直接取其上清液进行PCR反应。为排除细胞培养基抑制PCR反应，阳性对照中需加入等量的细胞上清液。悬浮细胞不能作为样品直接检测，会干扰PCR反应，需提取DNA并进行PCR。
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
xy1302 RDF-a 大鼠皮肤成纤维细胞-成年 Rat Dermal Fibroblasts-adult 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1303 RLF 大鼠淋巴成纤维细胞 Rat Lymphatic Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1304 RPAEpiC 大鼠肺泡上皮细胞 Rat Pulmonary Alveolar Epithelial Cells 1 x 10^6 cells/vial ATCC
xy1305 RPF 大鼠肺成纤维细胞 Rat Pulmonary Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1306 RRTEpiC 大鼠肾小管上皮细胞 Rat Renal Tubular Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1307 RRMC 大鼠肾系膜细胞 Rat Renal Mesangial Cells 5 x 10^5 cells per 1ml ATCC
xy1308 RHSteC 大鼠肝星状细胞 Rat Hepatic Stellate Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1309 RHMa 大鼠肝巨噬细胞 Rat Hepatic Macrophage 1x10^6 cells/vial ATCC
xy1310 RASMC 大鼠主动脉平滑肌细胞 Rat Aortic Smooth Muscle Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1311 RCM 大鼠心肌细胞 Rat Cardiac Myocytes 1 x 10^6 cells/vial ATCC
xy1312 RCF 心肌成纤维细胞 Rat Cardiac Fibroblasts 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1313 RLEpiC 大鼠晶状体上皮细胞 Rat Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1314 RMSC-bm 大鼠骨髓间充质干细胞 Rat Mesenchymal Stem Cells-bone marrow 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1315 RPMSC 大鼠肺间充质干细胞 Rat Pulmonary Mesenchymal Stem Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1316 ATCC
xy1317 猪细胞系统 ATCC
xy1318 PRA 猪视网膜星形胶质细胞 Porcine Retinal Astrocytes 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1319 PCEpiC 猪角膜上皮细胞 Porcine Corneal Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1320 PRPEpiC 猪视网膜色素上皮细胞 Porcine Retinal Pigment Epithelial Cells 6 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1321 PLEpiC 猪晶状体上皮细胞 Porcine Lens Epithelial Cells 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1322 ATCC
xy1323 马和狗细胞系统 ATCC
xy1324 HMSC-ad 马间充质干细胞--脂肪 Horse Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1325 EMSC-ad 马间充质干细胞--脂肪 Equine Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
xy1326 DMSC-ad 狗间充质干细胞--脂肪 Dog Mesenchymal Stem Cells-adipose 5 x 10^5 cells/vial ATCC
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文献和实验相关实验
using the AllPrep DNA/RNA 96 Kit. Real-time RT-PCR analysis of the PGK1 transcript was performed using a primer-probe set that could amplify and detect both mRNA and genomic DNA sequences. The flat amplification plot for the no RT control (-RT) indicates
Detection of Mycoplasma by Culture
agar plates and broths show no evidence of mycoplasma. Criteria for a Positive Result Test agar plates infected with mycoplasma show typical colony formation. Criteria for a Negative Result The test agar plates show no evidence of mycoplasma
PCR 克隆 主要有TA克隆 法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。 但因为TA克隆 法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR 产物的最佳克隆 方法。TA克隆 法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。 TA克隆 方法（Original TA Cloning Kit
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit
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