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上海信裕
DiI是一种亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构，进入细胞膜后，DiI在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，DiI被激发后可以发出橙红色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的 TRITC滤光片检测。
DiI通常不会明显影响细胞的生存力(viability)，因此被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
图一: DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱
DiI(细胞膜红色荧光探针)产品性质
| 同义名 | DiIC18(3)，DiI perchlorate | Cas No. | 41085-99-8 |
| 分子式 | C59H97ClN2O4 | 分子量 | 933.87 |
| Ex/Em | 549/565 nm | 推荐滤光器 | XF23-Omega, 31001-Chroma |
冰袋（wet ice）运输。产品-20 ºC干燥避光保存，有效期一年。
使用方法
1. 染色液制备
（1）配置DMSO或EtOH 储存液：储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1～5 mM。
注意：未使用的储存液保存在-20℃，分装保存，避免反复冻融。
（2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，配制浓度为1～5 μM的工作液。
2. 悬浮细胞染色
（1）悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
（2）在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
（3）染色细胞试管在1000～1500转离心5分钟。
（4）倾倒上清液，再次缓慢加入预温37℃的培养液。
（5）重复（3），（4）步骤两次以上。
DiI(细胞膜红色荧光探针)3. 粘壁细胞的染色
（1）使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
（2）从培养基中移走盖玻片，吸走过量培养液，将盖玻片放在潮湿的环境中。
（3）在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
（4）在37 ℃培养细胞 2～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。
（5）吸干染料工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，培养5～10分钟，然后吸干培养基。
4. 显微镜检测
（1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS滤光器的选择参见表1。
（2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005
5. 流式细胞仪检测
染色的细胞可以分别用经典的FL1，FL2，FL3和FL4流式细胞仪检测。
注意事项
1) 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Analysis of Complete Neuroblast Cell Lineages in the Drosophila Embryonic Brain via DiI Labeling
, consisting of specific neural cell types that develop in defined time periods. In this chapter we describe a method that labels entire NB lineages in the embryonic brain. Clonal DiI labeling allows us to follow the development of a NB lineage starting
，也可使流动性加大。 生物膜适宜的流动性是体现生物膜正常功能的必要条件，在一定范围内，膜流动性增加，有利于膜中酶分子的扩散和旋转运动，使酶活性增加。一些载体蛋白分子的运动性也取决于膜中脂类分子的流动性。研究发现肿瘤对化疗药物产生的耐药性主要与细胞膜P糖蛋白过度表达谷胱甘肽及其相关酶系活性改变有关，也有许多研究表明耐药细胞膜流动性较亲代敏感细胞明显增加。另有实验研究发现腹水癌细胞的恶性程度随着膜流动性的增加而增加，白血病及转移的肿瘤细胞的膜流动性远远高于非转移细胞。因此，对敏感及耐药的肿瘤细胞膜
主要分为两大类，第一类是 PKH67（绿色荧光）/PKH26（红色荧光），由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合，所以染色效果较好，应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料，包括DiI（橙色荧
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