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- 2025年07月15日
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上海信裕
1.当细胞铺满整个平皿(100mm)后,吸弃旧培养液，10mLPBS洗一遍
2.0.25%胰酶（预热20分钟左右）2ml消化，轻轻摇晃，Recombinant Human p53 Mutant细胞肿瘤抗原P53 突变型直至肉眼见单层细胞呈块状脱落（或在显微镜下观察细胞之间分离），立刻加5ml(DMEM+10%FBS)终止消化，轻柔吹打8-10次成单细胞。
3.离心1000rpm*5min,弃上清，加DMEM+10%FBS轻柔吹打。
4.将细胞悬液1:4传到100mm细胞培养皿中，每个皿加10ml(DMEM+10%FBS)培养液，正常情况下2-3天就可以长满，期间不用换液。
Recombinant Human p53 Mutant细胞肿瘤抗原P53 突变型的传代方法：首先在倒置显微镜下观察生长融合达80%，不需要长满，就准备传代。倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，我用的是25平方厘米的培养瓶，加入1毫升已经配制好的0.25%胰蛋白酶－0.02%EDTA(0.25%胰蛋白酶是用D-Hanks配制后先用滤纸过滤，再用一次性过滤器过滤除菌，Recombinant Human p53 Mutant细胞肿瘤抗原P53 突变型再分装成1ml的小包装，刚好每次用完一个，避免每次反复冻存，会使胰酶的活性下降），加入的量以刚好盖满瓶底为宜。放到倒置显微镜下观察变化，一旦发现细胞开始变园收缩，大约1－3分钟时间，必要时可以吹打帮助细胞分散，就立即加入培养基中和胰酶，如有EDTA最好要离心（800rpm,5min)，弃上清夜，Recombinant Human p53 Mutant细胞肿瘤抗原P53 突变型再加入完全培养基吹匀，再分瓶，一般一瓶可以分2－3瓶。放入5%的CO2培养箱，37度培养24小时后观察。
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文献和实验yu_ting 现在,急需知道MDA-231是P53野生型的还是突变型的?多谢 iscience 我用“MDA-231 p53”在google里面检索了一下，初步得知该细胞株系P53突变型（The human breast cancer cell line MDA-MB-231, which has high levels of a mutant p53...）。 请参考： http://www.ncbi
edwardellen 求助！！！ 本人菜鸟，最近开始接触凋亡相关信号，在HepG-2中做实验，有一点很困惑，HepG-2中的p53是野生型的还是突变型的？还是两者都存在？查了一些资料，有些文章之间表达的意思模凌两可。困惑啊！ 哪位好心的达人能给我一个确定的答案呢？ 另外，是否有做p53相关的牛人能告诉我P53在哪些实验用肿瘤细胞系中是野生型的，在哪些是突变型的？ 谢谢！谢谢！谢谢！ doctormy
Generation and Characterization of p53 Mutant Mice
p53 is one of the most well-characterized members of the tumor suppressor gene family. The role of p53 in controlling cellular homeostasis has proven critical, with over half of all human tumors having either lost or mutated p53
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