Hoechst 33258

Hoechst 33258产品描述

Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测，也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。

用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。

产品性质

中文名称（Chinese Synonym）

二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑

英文名称（English Synonym）

2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride; bisBenzimide H 33258; HOE 33258

分子式（Molecular Formula）

C25H24N6O·3HCl

分子量（Molecular Weight）

533.88

CAS号（CAS NO.）

23491-45-4

Hoechst 33258荧光光谱（Fluorescence Spectral）

Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 荧光可用氙气灯，泵弧灯或者UV激光激发；可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。

纯度（Purity）

≥95%（HPLC）

结构（Structure）


运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。

配制母液

Hoechst 33258溶于水，溶解度可达10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。

注意事项

1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1. 用PBS或合适的缓冲液制备10～50µM Hoechst 33258染色液。

2. 固定的细胞或组织染色：

Hoechst 33258对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。

a) 对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

b) 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。

c) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。

3. 活细胞或组织染色：

a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b) 在 37℃培养细胞 10～20 分钟。

c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。

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