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上海信裕
Hoechst 33258溶液产品描述
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光，对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可用于活细胞或组织的细胞核染色。
本系列产品均以溶液形式提供，其中Hoechst 33258 染液 (1mg/ml)（Cat No.40730ES03）为特定浓度的产品，其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst 33258染液(即用型)（Cat No. 40730ES10或Cat No. 40730ES50）为浓度经过优化的产品，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用粉末状该产品，可选购Hoechst 33258（Cat No. 40729ES25）。
产品性质
中文名称（Chinese Synonym）
二苯甲亚胺, 三氯化氢 2-(4-羟基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5-二-1H-苯并咪唑
英文名称（English Synonym）
2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式（Molecular Formula）
C25H24N6O·3HCl
Hoechst 33258溶液分子量（Molecular Weight）
533.88
CAS号（CAS NO.）
23491-45-4
荧光光谱（Fluorescence Spectral）
Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 荧光可用氙气灯，泵弧灯或者UV激光激发；可用DAPI滤光器、蓝色GFP滤光器、Alexa Fluor 350滤光器等检测。
纯度（Purity）
≥95%（HPLC）
结构（Structure）
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。
Hoechst 33258溶液使用方法
对于1mg/ml的Hoechst33258在使用时需用PBS或合适的缓冲液配制成0.5-10μg/ml的染色液。
1. 对于固定的细胞或组织
1) 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258 染色。
2) 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，并混匀。室温放置 3～5分钟。
3) 吸除 Hoechst 33258 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2～3 次，每次3～5 分钟。
4) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。激发波长350nm，发射波长460nm。
2. 对于活细胞或组织：
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在适宜于细胞培养的温度培养 20～30 分钟。
c) 弃染色液，用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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本系列产品均以溶液形式提供，其中Hoechst 33258 染液 (1mg/ml)（Cat No.40730ES03）为特定浓度的产品，其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst 33258染液(即用型)（Cat No. 40730ES10或Cat No. 40730ES50）为浓度经过优化的产品，确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用粉末状该产品，可选购Hoechst 33258（Cat No. 40729ES25）。
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纯度（Purity）
≥95%（HPLC）
结构（Structure）
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。
Hoechst 33258溶液使用方法
对于1mg/ml的Hoechst33258在使用时需用PBS或合适的缓冲液配制成0.5-10μg/ml的染色液。
1. 对于固定的细胞或组织
1) 对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258 染色。
2) 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量 Hoechst 33258染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，并混匀。室温放置 3～5分钟。
3) 吸除 Hoechst 33258 染色液，用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2～3 次，每次3～5 分钟。
4) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。激发波长350nm，发射波长460nm。
2. 对于活细胞或组织：
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在适宜于细胞培养的温度培养 20～30 分钟。
c) 弃染色液，用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长460nm。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验相关实验
Hoechst 33258染色1．原理 Hoechst 33258和Hoechst 33342均为非嵌人性荧光染料。它们在活细胞中 DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。活细胞或固定细胞均可从低浓度溶液中 摄取该染料。从而使细胞核着色。故又把此类染料称为DNA探针。Hoechst 33342和Hoechst 33258均可溶于水并在水溶液中保持稳定。Hoechsr-DNA的激发和发射波长分别550nm和460nm。在荧光显微镜紫外光激发时，Hoechst-DNA发出亮
Testing for Mycoplasma by Indirect DNA Stain (Hoechst 33258 stain)
Materials Media� pre-warmed to 37ºC (refer to the ECACC Cell Line Data Sheet for the correct medium) 70% ethanol in water (Prod. No. R8382 ) Methanol (Prod. No. 175 ) Acetic Acid Glacial (Prod. No. A6283 ) Hoechst 33258
韶光逐浅 我想问一下Hoechst凋亡染色试剂盒国产的哪个公司的好啊？ yunitongxing 原装进口试剂 韶光逐浅 好的，多谢啦 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
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Hoechst 33258溶液
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