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上海钰博
小鼠支气管上皮细胞完全培养基中已包含了高质量的血清和小鼠支气管上皮细胞所需生长因子,可直接用于小鼠支气管上皮细胞的培养。
注意事项:
1. 培养基为低温长途运输,收到后请先查看是否有漏液、破损或污染等,若出现问题请及时和我们联系。
2. 用75%的酒精擦拭瓶身,4℃保存。
A、 小鼠支气管上皮细胞完全培养基划线获得单个菌落的方法。划不出单个菌落的原因:
(1) 平板上有过多的水分;
(2) 划线时接种环未经反复灼烧。
(3) 多区划线,三区或四区划线。
B、 小鼠支气管上皮细胞完全培养基涂布和倾注的区别:
涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。
涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。
C、 小鼠支气管上皮细胞完全培养基培养基配制时应注意的问题:
(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
D、 小鼠支气管上皮细胞完全培养基平板的保存:大多数平板如VRBA、DC、、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
E、 小鼠支气管上皮细胞完全培养基产品的保存:
(1) 干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
(2) 亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
(3) 抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
(4) 兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。
F、小鼠支气管上皮细胞完全培养基观察时间的掌握:按SN、GB等标准或培养基的使用说明所述时间进行观察,时间过短或时间过长,单菌落的特征都不会很明显。如单增李斯特氏菌显色培养基,时间短单菌落看不到卵磷脂环,时间长绵羊李氏菌也会产生沉淀环。OXA、PALCAM的观察也如此,时间过长,李氏菌使整个平板成黑色,不利于观察单个菌落。
Hep-2 人喉癌细胞系
KMB-17 人二倍体细胞系
WI-38 人二倍体细胞系
MRC-5 人二倍体细胞系
HL 人二倍体细胞系
Hela 人宫颈癌细胞系
Hela/DDP Hela细胞耐药亚株
H9 人T淋巴细胞系
K562 慢性骨髓性白血病细胞系
Wish 人羊膜细胞系
HL-60 早幼粒急性白血病细胞系
MOLT-4 淋巴母细胞性白血病细胞系
A431 表皮癌细胞系
L-02 人胎肝细胞系
Hut-102 人T淋巴瘤细胞系
MCF-7 人乳腺癌细胞系
ZR-75-30 人乳腺癌细胞系
PK-15 猪肾细胞系
IBRS-2 猪肾细胞系
ST 猪睾丸细胞系
Sf-21 昆虫细胞系
SF-9 昆虫细胞系
L8824 草鱼肝脏细胞
CIK 草鱼肾脏细胞
WCF 团头鲂尾鳍细胞
SCF 白鲢尾鳍细胞
SiHa 人宫颈鳞状细胞癌
Ski 人宫颈上皮细胞癌
SW626 人卵巢腺癌细胞
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文献和实验利用 Millicell 培养小室培养皮肤及肺类器官的实验方案
的培养基。 在第8天或之后,可以使用常见的基于细胞的测定或抗体染色来分析细胞。 图2 . 人支气管上皮细胞人支气管上皮细胞的ALI培养。人支气管上皮细胞细胞在气-液界面( ALI ) (红蓝色)培养时呈现极性(蓝色)、细胞内紧密连接ZO-1 ( 红色 , AB2272 )和顶端CFTR表达( 绿色 , MAB3484 ),具有上皮屏障功能。 研究代表性文献: 囊性纤维化细胞模型和 CFTR 功能 囊性纤维化是一种遗传性疾病,影响包括肺和消化系统等多个器官系统。这种疾病的特征是黏液分泌腺体异常
无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。在开始进行新的细胞培养时,可以参考下表所列的条件: 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清 3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清 A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10%胎牛血清 AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体
ng/ml) 和 EGF (终浓度100ng/ml),用移液器吹打混匀,配制成肠基质胶。 13、将球状体滴加在预冷的肠基质胶中,并将样品混匀,总体积将达到 75μl (50μl 基质胶+ 25μl 培养基+球状体)。 14、将混合物接种在 4 孔板中,注意需接种在孔的中心,避免接触侧壁。 15、将 4 孔板放入 37℃,5%CO2 的培养箱中孵育 10min,使 Matrigel 固化。 16、向每个孔中缓慢滴加 5ml 肠道生长培养基,确保基质胶被完全覆盖。 17、每隔 4 天,或当培养基中的
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