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- 2025年07月13日
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- 详细信息
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4℃保存一年;-20℃长期保存
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10
- 供应商：
乔羽生物
- 规格：
瓶
编号：QY-mv0064
细胞名称：RAW264.7 小鼠单核巨噬细胞
规格：瓶
用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗.
RAW264.7 小鼠单核巨噬细胞报价细胞株培养无菌技术要点：
1. 实验开始前，无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌，用70%ethanol擦拭无菌操作台面，并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后，才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株，即使培养基完全相同也不可共用培养基，以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后，请将实验物品拿出工作台，用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后，才能进行下一个细胞株的操作。
2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞，必要物品（试管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暂时放置，其它实验用品使用完毕后应移出，有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成，请勿在边缘非无菌区域进行操作。
3. 小心取用无菌实验物品，避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处，也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后，请用手夹住瓶盖并轻握瓶身，倾斜大约45°角取用，尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。
4. 工作人员应当首先注意自身安全，必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作，并选择适当等级的无菌操作台进行（至少是Class II）。操作过程中，应避免引起aerosol的产生，小心有毒性药品，例如DMSO和TPA等，并避免针头的伤害等等。
5. 定期检测下列项目：
5.1. CO2钢瓶的CO2压力
5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染（水盘的水需用无菌水，每周定时更换）。
5.3. 无菌操作台内的airflow压力，定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜，预滤网（300小时/预滤网，3000小时/HEPA）。
6. 水槽内可添加消毒剂（Zephrin 1:750），需定期更换水槽中的水。
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢，普通的方法根本就不可能将它消化下来，这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得，简介如下：消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，实验前加温到37度以50ml培养瓶为例：1、细胞贴壁生长，长满瓶底80％时，弃去培养液，加D-HANKS 漂洗 两次；2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1－2ml,消化37℃约2-5min，镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化，弃消化液加D-HANKS 漂洗两次；3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
单核/巨噬细胞的分化成熟及组织分布 单核／巨噬细胞均来源于骨髓干细胞。发育成单核细胞后，进入血流分布于各种器官组织，并有不同的命名。如图2-12 单核巨噬细胞的组织分布 成熟的单核吞噬细胞表达多种表面分子．其中受体多达数十种，如免疫球蛋白的Fc受体FcyRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CDl6)，补体受体CRl和CR3和各种模式识别受体(包括甘露糖受体、清道夫受体、TLR)，以及多种细胞因子、激素、神经肽、多糖、糖蛋白和脂蛋白的受体(图2―13)，介导单核／
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