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4℃保存一年;-20℃长期保存
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10
- 供应商:
乔羽生物
- 规格:
瓶
编号:QY-mv0128
细胞名称:ZR-75-1人乳腺癌细胞
规格:瓶
用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗.
ZR-75-1人乳腺癌细胞报价细胞冻存
1.37°C水浴预热培养基(DMEM+10% FBS);
2.消化细胞后给细胞计数:
1)洗净晾干血小板计数板和盖玻片,将盖玻片完全覆盖计数区;
2)充分混匀细胞,取少量(0.1-0.5ml)细胞悬液与等体积的染色液台盼蓝混合,移液器吹吸混合均匀,用移液器取20ul混合液从盖玻片两端(与中间凹槽平行的两端)分别打入细胞,以细胞悬液刚好浸湿盖玻片为佳;
3)显微镜下,数四个计数区的总细胞数,无活性细胞染成蓝色,活细胞不被染色;
4)细胞密度=细胞总数/4×10000×2;
这里10000是不变的,因为计数的细胞是在体积为1mm×1mm×0.1mm即10-4cm3计数池内,1cm3=1ml,将四个计数区的细胞数除以4取平均数,乘2是补偿加等体积台盼蓝形成的稀释。
5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×100%。
注:细胞密度高时,可调整细胞悬液和台盼蓝的比例,计数时乘以相应的稀释倍数即可。
3.当细胞密度达到传代密度且细胞活性在90%以上时,可以冻存细胞。
4.在超净台中将要冻存的细胞移入离心管,1000rpm离心5min。
5.弃上清,用90%培养液+10%DMSO的混合液重悬细胞,并调整细胞密度为1-3×106/ml。
6.将细胞悬液分装到冻存管中(1-1.5ml/管)。
7.将装有细胞的冻存管放入程序降温冻存盒,-20°C放1-2h后,-80°C过夜,然后快速转移到液氮中。
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