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美中清水湾生物科技有限公司
Custom Adenovirus Production Service with Ad.MAX™ System:
Production of adenoviral vector is a tedious and time-consuming process. We have developed Ad.MAX™ technology, which contains a genetically engineered adenovirus packaging cell (Ad.MAX™ 293 cell) and a trans regulatory element in viral genome. This novel Ad.MAX™ system guarantees the expression of gene of interests (GOI), maximum adenovirus production and timely delivery. To learn more about Ad.MAX™ system, please visithttp://signagen.com/index.php?main_page=Technologies=#Ad_MAX
With our proprietary Ad.MAX™ system, we are offering the following custom adenovirus construction and production services to fit your different research needs.
1. Adenovirus Production, Full Service, Medium Scale: >2.0 ml at 2E+10~2E+11 PFU/ml* with 3 ~ 4 weeks
2. Adenovirus Production, Full Service, Large Scale: >2.0 ml at >5E+10~1E+12 PFU/ml* with 3 ~ 4 weeks
3. Adenovirus Production, Full Service, Pilot Scale: 1.0 ml at 1E+10~1E+11 PFU/ml* with 3 ~ 4 weeks
4. Adenovirus Amplification, Medium Scale: >2.0 ml at 1E+10~1E+11 PFU/ml* with 1 ~ 2 weeks
5. Adenovirus Amplification, Large Scale: >2.0 ml at 5E+10~1E+12 PFU/ml* with 1 ~ 2 weeks
Our Ad.MAX™ shuttle vector collections offer great flexibility for choosing a specific promoter and reporter.
更多详情：http://www.qswbio.com/gb17690.html
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文献和实验收集病毒。按步骤1收集细胞并准备病毒上清。通过Western blot和/或PCR鉴定重组腺病毒产生。 4、PCR鉴定重组病毒。取5μl病毒上清加入10μl蛋白酶K，55℃孵育1hr,再煮沸5min，离心后取1-2μl作PCR。 五、重组病毒扩增，纯化 1、75cm2方瓶中接种293细胞，至密度达到90%,加入适量病毒上清感染细胞。3-4d后，细胞几乎变圆，且有一半细胞漂浮，则收集所有细胞。约500g转速离心，弃上清。 2、以灭菌PBS重悬沉淀，反复冻融4次。4℃下7000g离心5min
重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作 （细菌内同源重组 AdEasy System ） 一 目的基因的克隆（以 pshuttle-CMV 质粒为例） 1. 选择适当酶切位点，进行酶切连接，将目的片段插入pshuttl-CMV质粒多克隆位点。 2. 重组质粒鉴定： 酶切鉴定或测序。 3. 重组质粒扩增，纯化并准备适量含目的基因的穿梭质粒。 4.
（一） 构建重组腺病毒载体的目的 1. 增加外源基因的装载容量 我们知道，腺病毒有一定的包装容积限制，大约在75~105%，即28~40kb左右，若超出此范围则或是不能包装或是发生分子重排。以5型腺病毒基因组36kb计算，在不对腺病毒基因组作任何改变的情况下，腺病毒载体最多可以转运2.8kb左右的外源基因，这对于许多基因治疗方案来说是远远不够的。为了进一步地扩大腺病毒载体的应用范畴，有必要缺失其基因组中的某些反式作用元件以增大其装载容积。 2. 降低免疫原性 如前
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