基因合成

诺禾致源基因合成

基因合成是指在体外人工合成双链 DNA 分子的技术，是基因获取的手段之一，相对于从已有生物中获取基因来说，基因合成无需模板，因而不受基因来源限制，可以获得自然界中不存在的基因，为人类改造生物开辟了一个全新的方向。基因合成作为合成生物学的底层技术，对疾病治疗、新药物、环境治理、新材料、 新能源等领域已得到了广泛的应用。

 

服务流程

服务详情  

产品名称	片段长度	价格	周期（工作日）	载体	交付结果
标准基因合成	最低构建费用	/	4-7	任意载体、诺禾免费 诺禾载体库请详询	1.4-5 μg 冻干质粒 DNA（低拷贝 2-4 μg 冻干质粒 DNA）   2. 可额外提供含有重组质粒的甘油菌（需在下单时备注）   3.QC 文件: 测序图谱、序列对比文件、质粒结构图、COA 文件
	＜1.5k		4-7
	1.5-3k		7-9
	3-5k		10-13
	5-8k		13-22
	> 8k		/
DNA 片段合成	＜2k	/	3	-	2000-500ng 干粉

注：交付周期针对非复杂序列转化典型 Ecoil 细胞系列中，如遇难度序列或非标准需求，周期会适当加长。如需构建到客户载体，以收到客户载体开始计算周期。

 

服务优势

1）交付周期短

最快 4 个工作日交付，及时交付率高达 99%。

2）准确率高

超冗余拼接和多点纠错工艺，测序验证保证序列 100% 正确。

3）性价比高

pmol 级合成技术区别于 nmol 级柱式合成的高成本浪费，大幅降低成本。

4）合成能力强

超长引物可跨过基因多重复区域，大幅提升困难基因合成能力。

5）免费密码子优化

根据不同宿主密码子偏好性进行密码子优化，从而达到优化蛋白表达的目的。

 

合成案例

1、经典合成案例——复杂结构

Poly 结构作为合成复杂的序列类型之一，常出现合成困难的情况。诺禾致源自主研发的基因合成平台对复杂序列合成可提供较好的解决方案。

目的序列片段

...AGTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAG...

结果展示：双向测序结果均完全正确

正向测序

反向测序

 

2、经典合成案例——长片段合成-10KB

TCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTG…(447bp)…

TAATAATTTCTTGGGTAGTTTGCAGTTTTAAAATTATGTTTTAAAATGGACTATCATATGCTTACCGTAACTTGAAAGTATTTCGATTTCTTGGCTTTATATATCTTG…(3004bp)…

AGCCTGGGCCTGACCCCCAACTTCAAGAGCAACTTCGACCTGGCCGAGGATGCCAAACTGCAGCTGAGCAAGGACACCTACGACGACGACCTGGACAACCTGCTGGC…(8769bp)…

TTCCCCGAAAAGTGCCACCTGACGTCTAAGAAACCATTATTATCATGACATTAACCTATAAAAATAGGCGTATCACGAGGCCCTTTCGTC

结果展示: 测序结果均完全正确

 

3、经典合成案例——GC 含量大于 80%，重复片段

……GGCGGCGGGGGACCTAGCCTGCCACCTCCTGCTGCCGCCGAGAGCGCCGGCTCTAGCCGGTGGCTGGGCGGAGGCGGCGGCGGCGGAGGCGGGGGCGGCGGCGGCGGCGGAGGAGGCGGAGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGAGGAGGCGGCGGGGGCGGCGGTGGTGGCGGGGGCGGAGGGGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGTGGCGGCGGCGGAGGAGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGTGGCGGCGGAGGCGGCGGCGGCGGAGGCGGAGGCGGCGGAGGAGGCGGCGGCGGCGGAGGCGGAGGCGGCGGAGGCGGGGTGGGCGT……

 

应用场景

实验类型	使用基因合成的应用
克隆和表达实验	合成目标基因的 DNA 序列，并将其插入表达载体中，以实现目标基因的表达。
基因敲除和基因敲入实验	合成小干扰 RNA（siRNA）或小核苷酸发夹（shRNA），以抑制目标基因的表达；合成 CRISPR RNA（crRNA）和转录单元（tracrRNA），用于导向 Cas9 蛋白靶向基因组中的特定位点，实现基因编辑和修饰。
双荧光素酶报告基因实验	构建包含双荧光素酶基因的报告基因载体，用于监测目标基因的表达水平和调控机制。
物种进化	合成不同动物的同源基因，探究其进化上的亲缘关系和功能适应性变化。
药物对靶点的作用效果验证实验	合成与疾病相关的基因，将其作为药物作用的潜在靶点进行研究。通过在细胞或动物模型中表达这些基因，观察药物对靶点的作用效果，验证靶点的有效性。
抗体定制	合成可变区域（variable region）或全长重链和轻链的基因序列，以构建定制的抗体或抗体库。
重组蛋白生产实验	合成编码药用蛋白的基因序列，如胰岛素、干扰素等，通过基因工程手段在微生物或细胞中生产。
疫苗制备	合成病毒或细菌的关键基因片段，用于制备核酸疫苗。
基因治疗实验	合成正常的基因导入患者体内，以纠正或补偿缺陷基因引起的疾病。
构建人工基因线路实验	构建一个能够根据环境信号（如特定化学物质的浓度）来控制细胞产生某种物质的基因线路。

 

常见问题

1、诺禾载体库中都有哪些载体？

合成订购表中已经列出几十种商业载体，请下载订购表查看。

2、  克隆到客户自己载体需要额外收费吗？

不收取亚克隆费用，客户首次寄送载体只需增加 3 个工作日进行验证，客户寄送载体样品尽量提供 1ug 以上。

3、订购表如何正确填写？

星号部分需要全部填写，尤其合成序列，酶切位点，载体序列；合成序列要包括两端酶切位点序列，特殊情况需提供最终构建图谱。

4、片段合成能保证 100% 正确吗？

片段交付只是保证相对高的克隆子正确率，无法保证 100% 克隆子正确率；除非后续克隆子出现同点缺失突变或者双方评估产物完全不正确，我们会进行免费重合。

5、基因难度判断依据是什么？

目的基因整体或者局部含有高 GC/低 GC，正向重复或者反向重复，影响 PCR 过程或者特殊二级结构被定义为难度基因。

6、密码子优化是什么？优化后对基因表达有什么影响吗？

同一氨基酸在不同宿主中，其对应的密码子会表现出不同程度的偏好性。密码子优化是利用偏好密码子并避免稀有密码子，从而优化序列在指定宿主中的表达。基因表达水平与密码子偏好性之间存在强相关性。诺禾拥有生信专研算法优化结合 GC，重复序列，mRNA 结构，密码子频率等参数实现基因高效表达。

7、收到质粒后，使用时应该注意什么？

质粒使用前可用无菌双蒸水或者 TE 稀释到您实验所需浓度。因常规科研级别没有去内毒素，不建议直接用于转染细胞或蛋白表达，可将质粒转化后挑取单菌落培养，使用符合需求的质粒抽提试剂盒提取。