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- 2025年12月24日
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上海达为科生物科技有限公司
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稳定细胞株筛选
稳定细胞株筛选实验原理：外源基因在细胞中的表达可分为两大类，一类是瞬时表达，一类是稳定表达（又叫长久表达）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平的表达，但通常只持续几天。后者外源DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的基因。建立稳定细胞株，一般是根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的**对靶细胞进行筛选。常用的抗性标记基因有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin）。
稳定细胞株筛选实验流程
1、载体构建（表达质粒载体、病毒载体）；2、转染/感染；3、目的蛋白初步检测；4、***筛选；5、目的蛋白再次检测（定性/半定量）；6、单克隆细胞株稳定性检测。四、 客户提供培养好的细胞五、 公司提供：基本实验步骤、图片、数据分析结果和稳定表达细胞株实验周期：大约3-4月左右，具体需要根据细胞实验内容而定。
公司位于上海长江软件园，目前具备较好的的生物学、医学技术服务平台，能够为广大客户提供医学科研样本检测、合作研究、开发及生产服务。
我们拥有专业的实验室、先进的实验设备和经验丰富的科研技术人员。技术团队包括研究员（博士后）2人，助理研究员（博士）4人，核心研究员（硕士）15人，主要致力于基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学、生物化学、病理检测、基因检测等技术在科研中的应用与推广。通过高度细分、较好的的服务平台，为广大客户提供了完善的技术解决方案和服务。
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文献和实验用慢病毒筛选稳定细胞株，以G418筛选方法为例，筛选出稳定整合Neomycin抗性基因的细胞系。 A 、 G418 抗生素最优浓度筛选 每种细胞对抗生素的敏感性不同，因此，准备建立稳定细胞系之前，需要确定能够在10-14天杀死细胞的最佳浓度。 方法如下 ： 1、将细胞稀释到1000个细胞/mL，接种到24孔板，每孔1ml。 2、接种后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选。3、每隔3天跟换1次培养液，保持G418浓度不变。 4、选择出
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