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        做好细胞划痕,只需这 6 步

        丁香园

        3644

        细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。


        1

        实验步骤


        1. 实验材料:细胞样品


        2. 实验仪器与耗材:6 孔板、marker 笔、直尺、枪头


        3. 实验试剂:无血清培养基、PBS


        2

        实验操作


        1. 准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和 marker 笔在操作前紫外照射 30 min(超净台内)。


        2. 先用 marker 笔在 6 孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔 0.5~1 cm 一道,横穿过孔。每孔至少穿过 5 条线。


        3. 在空中加入约 5X105 个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。


        4. 第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。


        5. 用 PBS 洗细胞 3 次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。


        6. 放入 37 度 5% CO2 培养箱,培养。按 0,6,12,24 小时取样,拍照。

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